小鼠肥大細(xì)胞瘤微小基因疫苗的研究.pdf

1、本研究一方面探討了肽與β2微球蛋白共價(jià)偶聯(lián)后形成的融合分子是否能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗原肽特異的T細(xì)胞反應(yīng)，以及該抗原肽特異性T細(xì)胞反應(yīng)能否達(dá)到有效的抗腫瘤免疫。同時(shí)，對(duì)共刺激分子CD80和細(xì)胞因子IL-15在腫瘤抗原肽特異性T細(xì)胞免疫中的作用進(jìn)行了初步研究?！　”狙芯繛榱搜芯咳甩?微球蛋白(β2m)基因啟動(dòng)子在小鼠肥大細(xì)胞瘤P815細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄活性，通過(guò)PCR擴(kuò)增技術(shù)，我們克隆了302bp的人微球蛋白基因啟動(dòng)子(B2M)，然后分別構(gòu)建以B2

2、M為啟動(dòng)子的增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)的報(bào)告載體以及以CMV為啟動(dòng)子的EGFP陽(yáng)性對(duì)照載體。將兩種質(zhì)粒DNA在電穿孔法介導(dǎo)下分別轉(zhuǎn)染P815細(xì)胞，采用RT-PCR的方法比較瞬時(shí)轉(zhuǎn)染P815細(xì)胞EGFPmRNA的表達(dá)。 本研究揭示了細(xì)胞因子IL-15在抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)中的作用，我們克隆了小鼠IL-15基因，并且在體外檢測(cè)到其生物活性。五聚體染色分析結(jié)果表明，IL-15可以增加pGL3/CD80-P1A注射免疫小鼠脾臟細(xì)胞