RNAi封閉內(nèi)源性c-Myc對(duì)鼻咽癌細(xì)胞5-8F生物學(xué)特性及分子機(jī)制影響的初步研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文RNAi封閉內(nèi)源性cMyc對(duì)鼻咽癌細(xì)胞58F生物學(xué)特性及分子機(jī)制影響的初步研究姓名：牛朝霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李桂源20070501中文摘要Control細(xì)胞系。通過(guò)RTPCR齊[IWestemblot鑒定Cmyc基因的封閉效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，I能有效抑制cmyc的高表達(dá)，效果達(dá)70％75％；II的效果不明顯。因此我們選擇抑制效果最佳的5—8F／siRNAc—mycI／c3口D

2、性單克隆細(xì)胞系進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)?！疽种芻—myc基因高表達(dá)對(duì)58F細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變】將58F、58F／siRNAControl和58F／siRNAc—mycI／C3進(jìn)行透射電鏡掃描，結(jié)果顯示：抑制cmyc表達(dá)的5—8F細(xì)胞表面微絨毛逐漸脫落，稀少；部分細(xì)胞結(jié)構(gòu)趨于正?；麧{內(nèi)線粒體數(shù)量中等，結(jié)構(gòu)較清晰，少量?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)；部分細(xì)胞趨于靜止?fàn)顟B(tài)，胞漿內(nèi)線粒體嵴丟失或呈空泡變，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張。空白對(duì)照及未處理5—8F細(xì)胞表面微絨毛較豐富，胞漿內(nèi)線粒

3、體數(shù)量較多，結(jié)構(gòu)較清晰，核漿比例嚴(yán)重失調(diào)。表明封閉cmyc的高表達(dá)有利于細(xì)胞間的緊密接觸，增強(qiáng)接觸抑制，不利于細(xì)胞的快速生長(zhǎng)，從而逆轉(zhuǎn)5—8F細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。【抑制cmyc高表達(dá)對(duì)58F細(xì)胞生長(zhǎng)的影響】將5—8F、58F／siRNAControl和58F／siRNAcmycI／C3細(xì)胞分別接種200個(gè)到平板中，靜止培養(yǎng)14天左右直至肉眼可見(jiàn)克隆形成，終止培養(yǎng)，觀察每組細(xì)胞的克隆形成數(shù)并計(jì)算克隆形成率；分別取o5104個(gè)細(xì)胞接種于9