肺鱗癌患者和健康人血清的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、肺癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，全球肺癌發(fā)病率和死亡率均居惡性腫瘤的首位。我國(guó)肺癌的發(fā)病率和死亡率在城市居惡性腫瘤的首位，在農(nóng)村居第三位。肺癌預(yù)后差、死亡率高的主要原因是缺乏有效的早期診斷方法。理論上，分子標(biāo)志物是腫瘤早期診斷最敏感的指標(biāo)。因此，尋找敏感性高、特異性好的肺癌血清標(biāo)志物已成為肺癌早期診斷的關(guān)鍵。 本研究采用二維凝膠電泳與質(zhì)譜聯(lián)用(2-DE/MS)以及十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳與質(zhì)譜聯(lián)用(SDS-PAGE/MS)兩條

2、技術(shù)路線(xiàn)篩選肺鱗癌患者和健康人的差異血清蛋白質(zhì)。首先采用2-DE和SDS-PAGE技術(shù)分離Ⅰ期肺鱗癌患者和健康人的血清蛋白質(zhì)，圖像分析軟件識(shí)別差異蛋白質(zhì)點(diǎn)或差異蛋白質(zhì)條帶，應(yīng)用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(ESI-Q-TOF MS/MS)鑒定差異蛋白質(zhì)，然后應(yīng)用Western blot和免疫組化方法分別檢測(cè)差異蛋白質(zhì)一結(jié)合珠蛋白-2(HP-2)在肺鱗癌血清和組織中的表達(dá)情況，進(jìn)一步探討HP-2的臨床應(yīng)用價(jià)值，以及HP-2在肺鱗癌患者血清中升高的原因。

3、 采用2-DE/MS路線(xiàn)識(shí)別了10個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，鑒定了4種差異蛋白質(zhì)，它們分別是：巨噬細(xì)胞表達(dá)的凋亡抑制因子、轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白相關(guān)蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白和HP-2。采用SDS-PAGE/MS路線(xiàn)識(shí)別了5條差異蛋白條帶，鑒定了50種蛋白質(zhì)。Western blot分析結(jié)果顯示，HP-2在肺鱗癌血清中的表達(dá)水平顯著高于健康人，但其表達(dá)水平與肺鱗癌的臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性；免疫組化結(jié)果顯示，HP-2在肺鱗癌組織中的表達(dá)水平高于癌旁正常支氣