小鼠條件性心臟特異過(guò)氧化物酶體增殖物激活型受體γ敲除導(dǎo)致心功能降低和心肌肥厚的研究.pdf

1、目的：過(guò)氧化物酶體增殖物激活型受體(Peroxisome proliferator-activated receptors，PPARs)是核受體超家族成員之一，存在3種亞型：PPARα、PPARδ和PPARγ，分別調(diào)控與脂質(zhì)代謝和糖代謝相關(guān)的某些蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄?，F(xiàn)在已經(jīng)證明PPARα和PPARδ通過(guò)不同的方式調(diào)控許多涉及脂質(zhì)代謝和糖代謝的基因表達(dá)，但是PPARγ調(diào)控心臟中脂質(zhì)和糖代謝的機(jī)制仍不十分清楚。本實(shí)驗(yàn)即研究小鼠心臟條件性敲除PPA

2、Rγ對(duì)心臟能量代謝和心功能的影響。
　　 方法：將MCM轉(zhuǎn)基因小鼠系和floxed-PPARγ轉(zhuǎn)基因小鼠系進(jìn)行雜交，成功構(gòu)建它莫西芬誘導(dǎo)的PPARγ心臟條件性敲除(MPG)小鼠系。以MCM小鼠為對(duì)照組，MPG小鼠為實(shí)驗(yàn)組，腹腔注射它莫西芬5天，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR和western-blot檢測(cè)CD36，H-FABP，F(xiàn)ATP1，CPT-Ⅰ，CPT-Ⅱ基因mRNA和蛋白質(zhì)水平的改變，心臟脂質(zhì)含量分析，超聲心動(dòng)圖檢測(cè)心臟結(jié)構(gòu)和心功能及

3、離體工作心檢測(cè)心臟代謝和心臟功能變化，心臟組織切片觀察心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變。
　　 結(jié)果：通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)TMCM對(duì)照組和TMPG實(shí)驗(yàn)組小鼠左室心肌標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組SOD1和SOD2在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)分別下降67％和23％。CD36，H-FABP，CPT-Ⅰ轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)分別下降65％，30％和50％。Western-blot檢測(cè)TMCM對(duì)照組和TMPG實(shí)驗(yàn)組小鼠左室心肌標(biāo)本發(fā)現(xiàn)CD36，H-FABP，CPT-Ⅱ蛋白含量也相應(yīng)的

4、下降。TMPG實(shí)驗(yàn)組比TMCM對(duì)照組的左室心肌總磷脂和總甘油三酯含量分別下降7％和50％。超聲心動(dòng)圖檢測(cè)發(fā)現(xiàn)成年小鼠心肌特異性PPARγ敲除2周后可導(dǎo)致輕微的心肌肥大，PPARγ敲除3個(gè)月后，心肌肥厚程度加重。離體工作心結(jié)果顯示，PPARγ心臟條件性敲除后心臟脂質(zhì)代謝下降，葡萄糖代謝無(wú)變化，心功能降低。
　　 結(jié)論：誘導(dǎo)PPARγ在成年心臟中缺失導(dǎo)致SOD1和SOD2的表達(dá)下降，過(guò)氧化物酶清除氧自由基能力下降；調(diào)控脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵