取代嘌呤類(lèi)似物的設(shè)計(jì)、合成及抗病毒活性研究.pdf

1、慢性乙型肝炎是一種由乙型肝炎病毒引起的慢性、進(jìn)展性、致死性疾病。我國(guó)是HBV病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)。一直以來(lái),核苷類(lèi)似物拉米夫定作為首選藥物用于臨床治療乙型肝炎,但是隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng),拉米夫定顯示出嚴(yán)重的耐藥性和肝毒性。近年來(lái),開(kāi)環(huán)核苷膦類(lèi)似物的9-(2-膦酰甲氧乙基)嘌呤類(lèi)化合物PME類(lèi)衍生物由于具有較好的抗病毒活性,耐藥率低,且高效低毒,因此得到了廣泛的重視。 阿德福韋酯作為開(kāi)環(huán)的核苷膦類(lèi)似物之一,在整個(gè)臨床前和臨床研究中,其

2、強(qiáng)效和安全性已經(jīng)得到廣泛的認(rèn)可,于2002年上市用于治療HBV,其化學(xué)結(jié)構(gòu)包含有腺嘌呤為堿基、直鏈醚鍵的側(cè)鏈、磷酸及雙吡呋酯等典型特征。臨床研究數(shù)據(jù)表明阿德福韋具有較強(qiáng)的抑制HBV DNA復(fù)制的作用,抗耐藥性強(qiáng),顯著優(yōu)點(diǎn)是對(duì)拉米夫定應(yīng)用后出現(xiàn)的YMDD變異株(包括YVDD和YIDD變異)病毒有很強(qiáng)的抑制作用,強(qiáng)度不低于對(duì)野生株的作用。長(zhǎng)期應(yīng)用阿德福韋治療慢性HBV,能顯著降低cccDNA水平,為循序漸進(jìn)的清除感染細(xì)胞里的HBV病毒庫(kù)并清

3、除受感染細(xì)胞帶來(lái)希望。因此,阿德福韋既可用于對(duì)拉米夫定耐藥的患者,也可以用于對(duì)拉米夫定不敏感的患者,且阿德福韋治療劑量10 mg/d相關(guān)的毒副作用很低。不過(guò),隨著近幾年研究的深入,發(fā)現(xiàn)阿德福韋在高劑量下有一定的腎毒性,也有文獻(xiàn)報(bào)道阿德福韋酯在體內(nèi)被酶水解釋放出阿德福韋,特戊酸和甲醛,當(dāng)服用高劑量阿德福韋酯時(shí),特戊酸可能會(huì)降低血清中的肉毒堿,而治療劑量范圍內(nèi)產(chǎn)生的甲醛,其毒性可以不需考慮。 本文通過(guò)分析總結(jié)開(kāi)環(huán)核苷膦類(lèi)似物的構(gòu)效關(guān)

4、系,以阿德福韋為先導(dǎo)化合物,采用生物電子等排設(shè)計(jì)理論,設(shè)計(jì)N-6位替換成巰基取代物或氮取代物,同時(shí)8位引入氮雜的6-取代巰基-8-氮雜嘌呤堿基骨架,采取保留磷酸基和引入雙三氟乙基酯及乙酯三種形式。設(shè)計(jì)了三條反應(yīng)路線,共合成了19個(gè)未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道新化合物。 首先以三氯化磷為起始原料,試圖經(jīng)過(guò)酯化、羥甲基化、磺酸酯化、烴化四步反應(yīng)得到目標(biāo)化合物。本路線在研究的初期并未取得成功,經(jīng)紅外圖譜確證發(fā)現(xiàn)第二步反應(yīng)沒(méi)生成目標(biāo)中間體。因此在此基礎(chǔ)

5、上設(shè)計(jì)了路線二：分別以5-氨基-4,6-二氯嘧啶及三氯化磷為起始原料,經(jīng)過(guò)烴化反應(yīng),環(huán)合反應(yīng)、羥甲基化、鹵代、酯化等合成得到目標(biāo)化合物。 在最初嘗試引入雙三氟乙基酯的合成方法時(shí),意外得到了新的磷酸酯交換結(jié)構(gòu),此結(jié)構(gòu)經(jīng)核磁氫譜、質(zhì)譜及紅外光譜確證為未見(jiàn)報(bào)道新的磷酸結(jié)構(gòu)形式,目前已合成2個(gè)該類(lèi)結(jié)構(gòu)分子。 經(jīng)抗乙肝病毒活性測(cè)試結(jié)果表明,其中2-(6-氨基-9H-嘌呤-9基)乙基2,2,2-三氟乙基氯甲基磷酸酯(3-9)表現(xiàn)出了

6、抗病毒活性,在10μg/ml時(shí)對(duì)乙肝病毒表面抗原具有12.1％抑制率(HBsAg 抑制率),其抗病毒活性與拉米夫定相當(dāng)(拉米夫定為14.2％);而且顯示了拉米夫定不具有的可抑制病毒復(fù)制的活性,對(duì)乙肝病毒e抗原(HBeAg)具有11.8％的抑制率,而拉米夫定為0％；毒性比阿德福韋酯大大降低,在50μg/ml時(shí),阿德福韋酯表現(xiàn)出了細(xì)胞毒性,而新化合物3-9在100μg/ml還未出現(xiàn)細(xì)胞毒性。這個(gè)新的化學(xué)結(jié)構(gòu)具有較高的繼續(xù)研究的價(jià)值,將在進(jìn)一