腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能對腹透患者預(yù)后影響及雷帕霉素改善腹膜結(jié)構(gòu)與功能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究分為三部分：
　　 第一部分、腹膜透析患者不同轉(zhuǎn)運(yùn)功能的臨床特點(diǎn)及預(yù)后
　　 目的：分析腹膜透析患者不同腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能對臨床特點(diǎn)和預(yù)后的影響。
　　 方法：入選上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院腎臟內(nèi)科從2006年1月—2007年12月開始維持性PD治療的患者（>18周歲）181例，以基線腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能將患者分為高轉(zhuǎn)運(yùn)組75例（包括：高轉(zhuǎn)運(yùn)、高平均轉(zhuǎn)運(yùn)）和低轉(zhuǎn)運(yùn)組106例（包括：低轉(zhuǎn)運(yùn)、低平均轉(zhuǎn)運(yùn)），比較兩組患者的

2、一般情況、腎臟原發(fā)病、透前合并癥、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、透析充分性、腹膜炎發(fā)生率、技術(shù)生存率、生存率、死亡原因。
　　 結(jié)果：兩組患者在腎臟原發(fā)病、透前合并癥、透前實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、透析充分性、腹膜炎發(fā)生率相似的情況下，兩組患者的技術(shù)生存率無明顯差異(P>0.05)，但高轉(zhuǎn)運(yùn)組患者近期(79.7％ vs87.9％)、遠(yuǎn)期(65.9％ vs73.4％)生存率均明顯低于低轉(zhuǎn)運(yùn)組(P<0.05)。高轉(zhuǎn)運(yùn)組患者基線時(shí)腹透超濾量(0.65±0.4

3、1 vs0.84±0.51，P　　 結(jié)論：腹膜高轉(zhuǎn)

4、運(yùn)患者生存率明顯降低，可能與腹透超濾不足、透后營養(yǎng)不良相關(guān)。
　　 第二部分、雷帕霉素對腹膜纖維化和轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響
　　 目的：采用雷帕霉素干預(yù)腹膜纖維化大鼠模型，觀察其對腹膜纖維化和轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響。
　　 方法：取40只SD雄性大鼠隨機(jī)分成5組，每組8只。N組為正常對照組，NS組為生理鹽水組，每日腹腔內(nèi)注入生理鹽水20ml。GLU、L-RAPA、H-RAPA組每日腹腔內(nèi)注入4.25％腹透液20ml，并于第1、3

5、、5、7天加入LPS150ug;其中L-RAPA組再予以雷帕霉素250ug/d灌胃，H-RAPA組雷帕霉素500ug/d灌胃。分別于第2ld和35d每組取4只大鼠測定腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能（腹透液超濾量、D2/DO:2小時(shí)/0小時(shí)腹透液葡萄糖濃度），并留取大鼠壁層腹膜行病理光鏡（HE染色、VG染色）、電鏡檢查；免疫組化方法觀察壁層腹膜FN、Co1I、α-SMA、TGF-β1、Reca、Ki67的表達(dá)；RT-PCR方法觀察腸系膜FN、Co1I、TG

6、F-β1 mRNA水平的表達(dá)。
　　 結(jié)果：①GLU組3周末的超濾量、D2/DO比值與N組相比減少(P<0.05)，5周末進(jìn)一步減少(P<0．Ol)，而L-RAPA、H-RAPA兩組無明顯下降；②3周和5周末GLU組腹膜間皮細(xì)胞脫落較嚴(yán)重，間皮下膠原基質(zhì)裸露，成纖維細(xì)胞、各種炎細(xì)胞浸潤明顯，新生血管豐富，間皮下膠原厚度較N組明顯增厚(P<0.01)，L-RAPA、H-RAPA兩組上述改變較GLU組明顯減輕，間皮下膠原較GLU組明

7、顯減少(P<0.01)；⑧3周和5周末GLU組腹膜FN、Co1I的沉積量，表達(dá)α-SMA、TGF-β1、Ki67的細(xì)胞數(shù)，表達(dá)Reca的血管數(shù)較N、NS兩組均明顯增加(P<0.01)，而L-RAPA、H-RAPA兩組與GLU組相比則明顯減少(P<0.01)④3周和5周末GLU組腸系膜FN、Co1I、TGF-β1 mRNA較N、NS兩組均明顯增加(P<0.01)，而L-RAPA、H-RAPA兩組與GLU組相比則明顯減少(P<0.01)。<

8、br>　　 結(jié)論：雷帕霉素有明顯的抑制腹膜纖維化、改善腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能的作用。
　　 第三部分、雷帕霉素對大鼠腹膜間皮細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子及細(xì)胞外基質(zhì)的影響
　　 目的：觀察雷帕霉素對腹膜間皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
　　 方法：大網(wǎng)膜消化法建立大鼠腹膜間皮細(xì)胞原代培養(yǎng)模型，通過倒置顯微鏡、免疫熒光的方法對細(xì)胞進(jìn)行鑒定。MTS的方法觀察不同濃度RAPA(O、0.1、1、10、100、1OOOnmol/l．O、0.2、0.4

9、、2、4、20nmol/l)對大鼠腹膜間皮細(xì)胞增殖的影響。RT-PCR方法觀察在TGF-β1(1Ong/ml)刺激下不同濃度RAPA(O、0.2、0.4、2、4、20nmol/l)對大鼠腹膜間皮細(xì)胞FN、Co1I、CTGF mRNA表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：20nmol/l濃度以上的RAPA明顯抑制大鼠腹膜間皮細(xì)胞的增殖(P<0.01)。FN、C01 I mRNA的表達(dá)在20nmol/l RAPA濃度組顯著下降(P