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1、目的:研究實(shí)驗(yàn)性葡萄膜炎動(dòng)物模型在各檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)眼部表達(dá)白介素-23(IL-23)mRNA及白介素-17(IL-17)mRNA的量以及動(dòng)物模型發(fā)病時(shí)眼部炎癥評(píng)分與IL-23mRNA、IL-17mRNA表達(dá)變化的相關(guān)性,為探討葡萄膜炎的發(fā)病機(jī)制提供可能的依據(jù),從而為臨床上尋找有效的預(yù)防和治療葡萄膜炎的方法提供參考依據(jù)。
方法:SD大鼠35只,雌性,周齡5~6周,體重180~210克。裂隙燈顯微鏡下檢查眼部排除眼部疾病。大鼠隨機(jī)分成
2、七組(A~G組),每組5只,A組為對(duì)照組,B~G組為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組每只大鼠雙側(cè)后足墊部位分別注射實(shí)驗(yàn)配制液:傷寒內(nèi)毒素100ug溶于PBS液50ul(PH=7.4)+50ulFreund完全佐劑,A組為對(duì)照組雙側(cè)后足墊部位分別注射PBS液100ul(PH=7.4)。大鼠注射內(nèi)毒素后每2小時(shí)觀察眼部癥狀變化并記錄評(píng)分。實(shí)驗(yàn)組分別于注射后6小時(shí)(h)、12h、18h、24h、48h,60h隨機(jī)選取一組大鼠處死,取雙眼葡萄膜視網(wǎng)膜混合后液氮冷
3、凍,對(duì)照組大鼠于注射PBS后24h處死,取雙眼葡萄膜視網(wǎng)膜混合并液氮冷凍。標(biāo)本行RT-PCR半定量檢測(cè)IL-23mRNA及IL-17mRNA的表達(dá)。對(duì)IL-23mRNA及IL-17mRNA的表達(dá)量與眼部炎癥評(píng)分做相關(guān)性分析。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組大鼠在注射內(nèi)毒素后4h即可于顯微鏡下見虹膜血管擴(kuò)張,6h可見前房輕度閃輝,血管充血加重,虹膜水腫,眼部炎癥評(píng)分(1.4±0.16)。18~24h可見瞳孔縮小;虹膜高度水腫,血管擴(kuò)張充嚴(yán)重,滲出
4、明顯,部分可見前房積膿,眼部炎癥評(píng)分最高為(5.4±0.44)。24h后癥狀逐漸好轉(zhuǎn),發(fā)病率為100%。對(duì)照組大鼠各時(shí)間點(diǎn)眼部炎癥評(píng)分無(wú)明顯變化。實(shí)驗(yàn)組大鼠葡萄膜組織中IL-23p19mRNA、IL-12/23p40mRNA及IL-17mRNA的表達(dá)比對(duì)照組高(P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)性分析結(jié)果眼部炎癥評(píng)分與IL-17mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r17=0.88,P<0.05)與IL-23p19/p40mRNA表達(dá)亦呈正相關(guān)性(
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