載脂蛋白-J mRNA在大鼠腦出血模型中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的:腦出血是神經(jīng)系統(tǒng)常見病、多發(fā)病,其致殘率和死亡率均很高,嚴(yán)重影響人類的健康和患者的生存質(zhì)量。近年來,炎癥反應(yīng)在腦出血后繼發(fā)性損傷中的作用越來越受到重視,并認(rèn)為它可能導(dǎo)致了腦出血后的細(xì)胞凋亡過程。目前腦出血后炎癥發(fā)生機(jī)制仍不十分清楚。近年來研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)體系統(tǒng)在腦損傷的炎癥反應(yīng)中起著重要作用。補(bǔ)體成分C3在補(bǔ)體中的含量最高,是兩條激活途徑的交匯點(diǎn)及補(bǔ)體發(fā)揮生物學(xué)作用的樞紐,因而測定補(bǔ)體C3的去向可以充分反映補(bǔ)體的活化功能和狀態(tài)；載脂蛋

2、白-J(apolipoprotein-J,Apo—J,又稱Clusterin)是新近發(fā)現(xiàn)的一種新型載脂蛋白,是一種多功能的糖蛋白,幾乎所有類型的細(xì)胞都能分泌這種蛋白,并且存在身體的所有體液中,在腦中濃度最高；許多研究表明載脂蛋白-J與多種生理功能關(guān)系密切,包括凋亡、補(bǔ)體調(diào)控、細(xì)胞膜保護(hù)、細(xì)胞與細(xì)胞以及細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用的穩(wěn)定性,DNA的修復(fù)作用。本實(shí)驗(yàn)通過檢測大鼠實(shí)驗(yàn)性腦出血病灶周圍相應(yīng)部位腦組織載脂蛋白-J(Apo-J)mRNA和C

3、3 mRNA的表達(dá)水平,分析其變化規(guī)律；分析Apo-JmRNA的表達(dá)水平與補(bǔ)體C3 mRNA是否存在相關(guān)性,以及分析Apo-J mRNA的表達(dá)水平與腦水腫程度(腦含水量)是否存在相關(guān)性,從而探索Apo-J在腦出血的病理生理過程中的作用機(jī)制,探索其疾病過程中的分子生物學(xué)機(jī)制,為找到更好的治療方法打下基礎(chǔ)。方法:SD大鼠150只,雌雄各半,體重300-350g,隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組及腦出血后3 h組、6 h組、12 h組、1d組、3d組

4、、5d組和7d組,每組10只。在腦立體定位儀下采用自體血注入尾狀核法制備腦出血模型。于制模后3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d7個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物,用干濕重法測量腦含水量(BWC)；進(jìn)行ICH組神經(jīng)功能缺失評分；RT-PCR法檢測ApoJmRNA及補(bǔ)體C3mRNA的表達(dá)水平。全部資料用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用“平均值士標(biāo)準(zhǔn)差"表示,P<0.05為差異存在,P>0.05為差異不存在。結(jié)果:1、腦出血組各觀察時(shí)間

5、點(diǎn)神經(jīng)功能障礙評分顯著低于正常組、假手術(shù)組(P<0.05),腦出血組神經(jīng)功能障礙評分在3d時(shí)最低。2、腦出血組腦含水量各觀察時(shí)間點(diǎn)與正常組及假手術(shù)組比較,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其他各時(shí)間點(diǎn)腦含水量明顯低于3d組,比較P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；3、正常組大鼠腦組織C3mRNA可見低水平表達(dá)；腦出血組明顯高于正常組及假手術(shù)組(P<0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中3d組C3mRNA表達(dá)水平最高,其他各觀察時(shí)間點(diǎn)與3d組比較(P<0.05

6、),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、正常組大鼠腦組織Apo-JmRNA.可見低水平表達(dá)；腦出血組明顯高于正常組及假手術(shù)組(P<0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中3d組Apo-JmRNA表達(dá)水平最高,其他各觀察時(shí)間點(diǎn)與3d組比較(P<0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、ICH各組神經(jīng)功能障礙評分與相應(yīng)各組血腫周圍腦組織含水量呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.6603,P<0.05)；6、腦出血模型手術(shù)側(cè)C3 mRNA表達(dá)值與腦含水量之間呈正相關(guān)關(guān)系(R=0.758,P<0

7、.05)；7、腦出血模型手術(shù)側(cè)ApoJmRNA表達(dá)值與腦含水量之間呈正相關(guān)關(guān)系(R=0.702,P<0.05)；8.腦出血模型手術(shù)側(cè)ApoJ mRNA表達(dá)值與C3mRNA表達(dá)值之間呈正相關(guān)關(guān)系(R=0.908,P<0.05)。結(jié)論:1、大鼠腦出血急性期補(bǔ)體C3mRNA表達(dá)增高,并與腦水腫程度呈正相關(guān),提示有補(bǔ)體系統(tǒng)的激活,補(bǔ)體系統(tǒng)可能參與了大鼠腦出血腦水腫的形成及神經(jīng)元的損傷。2、大鼠腦出血后Apo-JmRNA表達(dá)增高,3天達(dá)高峰。且與