卵巢過度刺激綜合征細(xì)胞內(nèi)各離子濃度的變化.pdf

1、目的：卵巢過度刺激綜合征是促排卵過程中發(fā)生的醫(yī)源性并發(fā)癥。其病理生理改變主要為毛細(xì)血管通透性增加,血漿外滲,形成腹水、胸水,血液濃縮及其引發(fā)的一系列改變,涉及到循環(huán)、呼吸、消化、凝血等多器官系統(tǒng),嚴(yán)重者可危及生命。近年,OHSS的發(fā)病率逐漸增高,但發(fā)病機(jī)制卻未完全闡明,臨床治療僅為支持對癥治療。探索OHSS的發(fā)病機(jī)制,尋找對因治療具有重要的現(xiàn)實意義。
　　 目前,對細(xì)胞離子方面的研究鮮有報道,而血管通透性的改變與細(xì)胞離子的變化息

2、息相關(guān),密不可分。所以,本研究從離子角度出發(fā),研究卵巢過度刺激綜合征發(fā)病過程中細(xì)胞內(nèi)游離鈣、鈉、鉀、氯離子濃度有無變化、如何變化。探索各離子變化與OHSS發(fā)病的相關(guān)性。為尋找安全、有效、經(jīng)濟(jì)、簡便的治療方案提供理論依據(jù)。
　　 材料與方法：22—25日齡50g—70g Wistar清潔級雌性大鼠隨機(jī)分為實驗組、對照組,每組5—6只。實驗組制作卵巢過度刺激綜合征模型:PMSG50IU每日注射共4天,第5天給予HCG100IU,注射

3、。對照組注射等體積的生理鹽水。
　　 最后一次注射后72小時采血,測定血漿雌二醇、血管內(nèi)皮生長因子水平,卵巢、子宮取出稱重確定模型成功。
　　 熒光染色方法測定細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+、Na+、K+、Cl-離子濃度。冷生理鹽水洗滌紅細(xì)胞,制備細(xì)胞懸液,調(diào)節(jié)紅細(xì)胞密度為20×109/l。制備Ca2+、Na+、K+、Cl-熒光探針Fluo-3/AM、SBFI-AM、PBFI-AM、MQAE的應(yīng)用液,分別裝載紅細(xì)胞,每100μl為一

4、個裝載單位,37℃孵育60分鐘。洗去細(xì)胞外探針后,繼續(xù)孵育30分鐘。顯微熒光分光光度計調(diào)節(jié)到相應(yīng)激發(fā)波長和發(fā)射波長,分別測定細(xì)胞內(nèi)與各離子結(jié)合的相應(yīng)探針的光度值,此光度值反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)游離離子的平均濃度。
　　 結(jié)果：實驗組卵巢、子宮重量,血漿雌二醇、VEGF水平與對照組比較均明顯增加,差異具顯著性意義(P＜0.01),大鼠卵巢過度刺激模型建立成功。
　　 實驗組與對照組各離子探針的熒光光度值分別為:Ca2+∶12.04±0

5、.55、22.42±2.51；Na+∶10.48±0.20、34.27±1.05;K+∶13.98±0.69、9.59±1.42;Cl-∶470±47.36、243.1±21.1。兩組比較,差異均具顯著性意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：卵巢過度刺激綜合征時細(xì)胞內(nèi)游離鈣、鈉、鉀、氯離子濃度變化顯著。其中鈣、鈉、氯離子濃度降低,鉀離子濃度升高。這些離子濃度的變化與血管內(nèi)皮細(xì)胞功能改變密切相關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)為探索新的治療方法打下基礎(chǔ)。