利拉魯肽對高脂作用下胰島β細(xì)胞TCTP和PERK表達(dá)的影響.pdf

1、實驗一：
　　目的：
　　觀察FFA作用下胰島βTC3細(xì)胞和高脂喂養(yǎng)大鼠胰腺組織TCTP表達(dá)的改變以及Lira對此細(xì)胞水平上改變的干預(yù)作用。
　　方法：
　　1．將βTC3細(xì)胞分為5組，即對照組和FFA組（0.125，0.25，0.5及1mmol/L），孵育24h后，Western blot方法檢測TCTP的表達(dá)。再分為對照組，F(xiàn)FA組，和FFA+Lira組（0.5mg/L和1mg/L），Lira預(yù)孵育6h后，1

2、mmol/LFFA繼續(xù)孵育24h，Western blot檢測TCTP和活性caspase-3的表達(dá)。
　　2．12只成年SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩組，正常飲食組（ND，n=6）和高脂飲食組（HFD，n=6），分別給予普通和高脂飼料喂養(yǎng)20周后檢測血脂確定高脂大鼠成模。實時定量PCR和Western Blot分別檢測兩組大鼠胰腺TCTP mRNA和蛋白相對表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1．不同濃度FFA孵育24h后，0.5m

3、mol/L和1mmol/L FFA組TCTP表達(dá)下調(diào)(P<0.05)；與1mmol/LFFA組相比，0.5mg/L Lira+1mmol/L FFA和1mg/LLira+1mmol/L FFA組TCTP表達(dá)上調(diào)(P<0.05)，活性caspase-3表達(dá)下調(diào)(P<0.05)，兩組之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　2．與ND組相比，HFD組血甘油三酯（HFD1.18±0.06 vs ND0.89±0.03，mmol/L，P＜0

4、.01)和總膽固醇（HFD2.37±0.13 vs ND1.77±0.12，mmol/L，P＜0.01）升高；胰腺組織TCTPmRNA和蛋白表達(dá)水平兩組無差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1．一定濃度的FFA作用能夠下調(diào)βTC3細(xì)胞TCTP的表達(dá)，而Lira可以減輕FFA水平異常導(dǎo)致的βTC3細(xì)胞TCTP的下調(diào)，上調(diào)TCTP的表達(dá)可能是Lira抗凋亡作用的一個機(jī)制。
　　2．高脂喂養(yǎng)的SD雄性大鼠胰腺TCTP m

5、RNA和蛋白表達(dá)無變化。
　　實驗二：
　　目的：
　　探討FFA作用下胰島βTC3細(xì)胞PERK的表達(dá)及Lira對其表達(dá)的干預(yù)作用。
　　方法：
　　βTC3細(xì)胞，分為對照組和FFA組（0.125，0.25，0.5及1mmol/L）孵育24h，Western blot方法檢測PERK的表達(dá)。然后，分為對照組，F(xiàn)FA組和FFA+Lira組（0.5mg/L和1mg/L），Lira預(yù)孵育6h后，1mmol/L F

6、FA繼續(xù)孵育24h，Western blot檢測PERK的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．不同濃度FFA孵育24h后，與對照組相比，1mmol/LFFA組PERK表達(dá)增加(P<0.05)。
　　2．與1mmol/L FFA組相比，0.5mg/L Lira+1mmol/L FFA和1mg/L Lira+1mmol/L FFA組PERK表達(dá)減少(P<0.05)，兩組之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：