核仁素在2型糖尿病性心肌病中的表達(dá)及其作用研究.pdf

1、目的:糖尿病性心肌病是糖尿病患者常見的并發(fā)癥，其主要的病理表現(xiàn)為心肌細(xì)胞凋亡增加、心肌間質(zhì)膠原累積、心肌細(xì)胞肥大。核仁素是一種多功能的RNA結(jié)合蛋白，與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。本研究首次利用心肌特異性過表達(dá)核仁素C57BL/6小鼠構(gòu)建了2型糖尿病，以探討核仁素在糖尿病性心肌病中的作用。
　　方法:采用核仁素轉(zhuǎn)基因小鼠給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)20周加鏈脲佐菌素(STZ)小劑量連續(xù)腹腔注射（第5周開始，劑量60 mg/Kg, qw×2）構(gòu)建2型

2、糖尿病模型;實(shí)驗(yàn)分為4組:野生型小鼠對(duì)照組、核仁素轉(zhuǎn)基因小鼠對(duì)照組、野生型小鼠糖尿病組、核仁素轉(zhuǎn)基因小鼠糖尿病組;8周末檢測(cè)糖尿病相關(guān)指標(biāo);12周末采用免疫印記(Western blot)和免疫組化（IHC）檢測(cè)心肌核仁素蛋白的表達(dá)水平;通過蘇木素-伊紅(HE)染色、Masson染色、原位末端標(biāo)記(TUNEL)染色、麥胚凝集素(WGA)熒光染色分別觀察心肌形態(tài)學(xué)改變，心肌纖維化程度，心肌細(xì)胞凋亡程度以及心肌細(xì)胞肥大程度;20周末采用Po

3、werlab system檢測(cè)小鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　1.糖尿病組小鼠空腹血糖值較對(duì)照組明顯升高（糖尿病組血糖值是對(duì)照組的1.6倍，P＜0.05）;
　　2.Western blot及IHC顯示野生型糖尿病組小鼠心肌核仁素蛋白水平較野生型對(duì)照組明顯升高（與野生型對(duì)照組相比分別升高了2.47倍，1.48倍，P＜0.05）;
　　3.與野生型對(duì)照組相比，野生型糖尿病組小鼠心肌HE染色、Masson染

4、色、TUNEL染色及WGA染色分別顯示心肌細(xì)胞排列紊亂，部分肌纖維出現(xiàn)斷裂及溶解;心肌纖維化明顯增加;心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增加;心肌細(xì)胞明顯肥大。轉(zhuǎn)基因糖尿病組與野生型糖尿病組比較，以上情況有所改善;
　　4.Powerlab system檢測(cè)血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示野生型糖尿病組小鼠多項(xiàng)心功能指標(biāo)異常，轉(zhuǎn)基因糖尿病組小鼠與野生型糖尿病組相比心功能明顯改善。
　　結(jié)論:
　　1.糖尿病性心肌病小鼠心肌中核仁素蛋白表達(dá)水平升高