全反式維甲酸及其衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯對A549細(xì)胞增殖、遷移能力和骨橋蛋白表達(dá)的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：研究全反式維甲酸(ATRA)及其新型衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯(ATPR)對人肺腺癌細(xì)胞株A549增殖、遷移能力和骨橋蛋白表達(dá)的影響,并初步探討其可能的分子機(jī)制。
　　方法：以人肺腺癌細(xì)胞株A549為研究對象,分別予以不同濃度(1、2.5、5、7.5、10、25、50mg/L)的ATRA及ATPR進(jìn)行干預(yù)3天,隨后用5mg/L濃度的ATRA及ATPR分別進(jìn)行干預(yù)1、3、7天后,四甲基偶氮唑藍(lán)比色(MTT)法測定

2、A549細(xì)胞的增殖情況,了解藥物與細(xì)胞增殖的量效及時效關(guān)系;用Westernblot的方法檢測ATRA、ATPR對骨橋蛋白(OPN)表達(dá)、c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminalkinase,JNK)磷酸化程度的影響;分析A549細(xì)胞增殖率與其細(xì)胞內(nèi)OPN表達(dá)量的相關(guān)性;并加入JNK通路抑制劑(SP600125),分析ATRA、ATPR對A549細(xì)胞增殖、遷移及OPN表達(dá)的影響是否與JNK信號通路有關(guān)。應(yīng)用SPSS13.0

3、進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,組間比較采用單因素方差分析,相關(guān)性分析采用秩相關(guān)分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:1.ATRA以及ATPR用藥組能顯著抑制A549細(xì)胞的增殖,抑制率隨藥物濃度的增加而增高,隨藥物作用時間的延長而提高,呈濃度及時間依賴性,ATRA和ATPR的IC50分別為11.5、4.6mg/L,提示ATPR作用效果要明顯優(yōu)于ATRA。2.劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示10mg/LATRA和ATPR均可抑制A

4、549細(xì)胞的遷移,ATPR對A549細(xì)胞遷移能力的抑制作用要優(yōu)于ATRA。3.Westernblot結(jié)果分析顯示,5、10mg/LATRA和ATPR能夠抑制OPN蛋白表達(dá),提高JNK磷酸化水平,激活JNK信號通路,而對JNK蛋白表達(dá)無明顯影響。4.A549細(xì)胞增殖率與OPN的表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.971,P=0.01)。5.加入JNK通路抑制劑SP600125后,ATRA、ATPA和SP600125聯(lián)合用藥組與ATRA、ATPR單獨(dú)用