檢測腫瘤標(biāo)志物的量子點免疫層析平臺的構(gòu)建.pdf

1、近年來發(fā)展起來的免疫層析試紙條檢測技術(shù)具有檢測方便、成本低廉、操作簡單的優(yōu)點，但靈敏度低，難以定量檢測等缺點限制了其在腫瘤標(biāo)志物檢測中的發(fā)展。將量子點引入到試紙條中，可有效結(jié)合量子點熒光檢測和免疫層析檢測各自的優(yōu)勢，彌補現(xiàn)有免疫層析試紙條檢測的缺陷，實現(xiàn)一種快速、靈敏、便捷的定量檢測。
　　本文首先通過高溫注射法以及 SILAR法制備了具有合金殼層結(jié)構(gòu)的量子點，探討了影響量子點熒光性能的因素。其次，將十八胺（ODA）接枝到三嵌段共

2、聚物（聚叔丁基丙烯酸脂-乙基丙烯酸脂-甲基丙烯酸）羧基側(cè)鏈上，合成了雙親性嵌段共聚物 ABC-g-ODA，并將其用于量子點水溶性改性，得到了熒光效率高，穩(wěn)定性好的量子點熒光納米球。然后，將其作為熒光信號標(biāo)記物，制備了量子點熒光免疫層析試紙條，研發(fā)了量子點免疫熒光檢測儀，并全面評價了試紙條的質(zhì)量，并初步檢測了15例臨床病人血清。最后，構(gòu)建了可同時檢測兩個腫瘤標(biāo)志物的量子點熒光編碼試紙條，并對其編碼和定量能力進行了評價。
　　實驗結(jié)果

3、表明：制備的具有合金殼層結(jié)構(gòu)的CdSe量子點結(jié)晶度高、粒徑分布均勻、形貌規(guī)則，熒光產(chǎn)率高，熒光性能穩(wěn)定?？赏ㄟ^控制反應(yīng)前體比例，反應(yīng)溫度和反應(yīng)時間，合金殼層的結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)量子點的發(fā)射波長。FTIR和1HNMR譜圖證實了ODA被成功接枝在嵌段共聚物的羧基側(cè)鏈上，用 ABC-g-ODA改性量子點得到的熒光納米球粒徑均勻，成球性好，呈單分散，易于功能化；相比于二氧化硅和配體交換改性法得到的水溶性量子點，量子點熒光納米球穩(wěn)定性更好，PBS緩沖液中存

4、儲20天以上，粒徑、表面電位和熒光強度無明顯變化；強酸性條件下儲存兩天依然能保留30％左右的熒光。將量子點熒光納米球作為熒光信號標(biāo)記物引入到免疫層析檢測中，通過對試紙條組成材料的選擇和體系的優(yōu)化，成功構(gòu)建了基于量子點免疫層析的腫瘤標(biāo)志物檢測平臺，并初步用于 AFP、PSA、HCG三種腫瘤標(biāo)志物的定量檢測。反應(yīng)僅需10~20 min，特異性好、靈敏度高。15例臨床血清樣本檢測結(jié)果與電化學(xué)發(fā)光檢測結(jié)果基本相符。在此基礎(chǔ)上構(gòu)建的量子點熒光編碼