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文檔簡介
1、本研究在兔視網(wǎng)膜倍頻532nm激光損傷模型建立的基礎(chǔ)上,進行太子參皂苷提取物中藥干預(yù),探討其對于視網(wǎng)膜激光損傷是否具有防護作用及其機制。主要分兩部分進行:
第一部分視網(wǎng)膜激光損傷模型的建立
目的:通過倍頻532nm激光照射青紫藍(lán)兔眼底,觀察不同時期視網(wǎng)膜光斑區(qū)域組織形態(tài)學(xué)改變。
方法:20只健康青紫藍(lán)兔隨機分為A組16只(激光損傷組)和B組4只(正常對照組),使用倍頻532nm激光照射A組兔視網(wǎng)膜(光斑大小
2、200um,脈寬0.05s,光斑TsoⅢ),B組未行光凝。按激光光凝術(shù)后不同時相點:1天(d),1周(w),2周(w),1月(m)觀察眼底照片的改變、光鏡下組織形態(tài)學(xué)改變、電鏡下超微結(jié)構(gòu)的改變及光斑直徑在不同時相點的變化。
結(jié)果:①眼底照相:隨時間推移,光斑由1d時的濃白色水腫外觀變?yōu)?m時的黑色素附著區(qū)域;②光鏡觀察:光凝后光斑區(qū)域主要損傷集中在視網(wǎng)膜外層,光感受器細(xì)胞壞死、凋亡,隨時間推移,膠質(zhì)細(xì)胞,色素細(xì)胞充填損傷區(qū)域,
3、形成纖維增殖;③電鏡觀察:光凝后出現(xiàn)明顯的視細(xì)胞外節(jié)膜盤結(jié)構(gòu)模糊,排列紊亂,線粒體嵴模糊、斷裂甚至消失,明顯的空泡樣變,1w開始即出現(xiàn)細(xì)胞染色質(zhì)集邊等凋亡改變,后期膠原纖維增殖;④光斑大小:光斑大小從1d時的最大值隨時間推移,逐漸變小,1w時光斑大小縮小15%,2w時光斑大小縮小20%,1m時光斑大小縮小21%。
結(jié)論:倍頻532nm激光照射青紫藍(lán)兔黃斑區(qū),光斑反應(yīng)1d時最為明顯,至2w左右基本穩(wěn)定。
第二部分太子參
4、皂苷提取物對視網(wǎng)膜激光損傷保護作用的研究
目的:在視網(wǎng)膜激光損傷基礎(chǔ)上,使用太子參皂苷提取物進行灌胃干預(yù),通過模型對照,分析其對于激光損傷視網(wǎng)膜的保護作用。
方法:58只青紫藍(lán)兔隨機分為三組:A組(太子參皂苷提取物灌胃組),B組(等量生理鹽水灌胃組),C組(空白對照組),按視網(wǎng)膜光凝術(shù)后不同時相點分為1d,1w,2w,1m四個亞組,在不同時相點分別進行眼底照相比較,光鏡和電鏡觀察、SOD(superoxidedism
5、utase,超氧化物歧化酶)、MDA(malondialdehyde,丙二醛)、TUNEL測定及c-fos、bax基因的表達水平的比較。
結(jié)果:A組光斑大小普遍小于B組;1d時A組SOD含量明顯高于B,C兩組(P=0.001),各時相點B組SOD含量均要顯著低于A,C兩組(P<0.001);并且A組的MDA含量要顯著低于B、C組(P<0.001);各個時相點,A組細(xì)胞凋亡率均要顯著低于B組;不同時相點三組比較,c-fos基因表
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