綠色反光對(duì)視網(wǎng)膜光損傷減緩作用的研究.pdf

1、目的: 將教輔材料所用的綠色紙張與白色紙張作為背景制作成光照箱，建立光損傷模型，探討綠色反光對(duì)視網(wǎng)膜光損傷形態(tài)及功能的影響，探索綠色及綠色反光是否能對(duì)視網(wǎng)膜的光損傷起到減緩作用，給人們帶來(lái)綠色及綠色反光對(duì)視網(wǎng)膜保護(hù)理念的轉(zhuǎn)變，為探究視網(wǎng)膜變性疾病等的預(yù)防手段奠定基礎(chǔ)。
　　 方法: 將96只健康無(wú)眼病成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠（體重180-220g），隨機(jī)分成正常對(duì)照組，光損傷組，綠色反光組和白色反光組各2

2、4只。光照箱共有三層結(jié)構(gòu)組成，從外到里分別是光照箱外層、光照架、鼠籠。光照箱外層，綠色反光組采用綠色紙張貼附于其內(nèi)壁，白色反光組光照箱內(nèi)壁貼附白色紙張，光損傷組采用透明玻璃板。光照箱四面具有排風(fēng)孔，工作溫度控制在25℃。正常對(duì)照組不給予任何處理，保證飲食飲水自由。建立視網(wǎng)膜光損傷模型，三組采用相同光源，箱內(nèi)中心照度為2800Lux，僅光照箱不同。大鼠均在12小時(shí)明及12小時(shí)暗的循環(huán)光環(huán)境中適應(yīng)7天，光照前暗適應(yīng)24小時(shí)，以提高視網(wǎng)膜光敏

3、感性。光照20min前，滴加阿托品眼藥水充分?jǐn)U瞳，然后放入光照箱接受24小時(shí)持續(xù)光照（早上8:00開(kāi)始）。光損傷過(guò)程中保證大鼠飲食的足量供給，飲水自由。在光照結(jié)束后經(jīng)24h暗恢復(fù)，于光照組光照后1天、2天、7天及14天（每一時(shí)間點(diǎn)，每組n=6）分別取每組大鼠右眼顳上方視網(wǎng)膜，HE染色光鏡下觀察同一定位處視網(wǎng)膜組織形態(tài)、c-fos表達(dá)檢測(cè)及免疫組織化學(xué)分析;取各組大鼠左眼，測(cè)定其視網(wǎng)膜組織MDA含量及T-SOD活性的變化，將各組對(duì)照并進(jìn)行

4、統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果: 在各時(shí)間點(diǎn)的標(biāo)本中，以第一天損傷最重，光鏡下可以觀察到光感受器的內(nèi)外節(jié)分界不清，外節(jié)主要呈顆粒狀，水腫變性，內(nèi)節(jié)結(jié)構(gòu)紊亂呈絲狀排列，水腫;外核層細(xì)胞表現(xiàn)為排列紊亂，細(xì)胞變性、變薄，白色反光組約3-5個(gè)胞核厚度，光損傷組5-6個(gè)細(xì)胞核度，綠色反光組約7-8個(gè)胞核厚度。第二天，在各時(shí)間點(diǎn)的標(biāo)本中，光鏡下可見(jiàn)光感受器內(nèi)外節(jié)分界欠清，外節(jié)呈顆粒狀，水腫變性程度較之前輕，內(nèi)節(jié)絲狀排列結(jié)構(gòu)亂，水腫;外核層細(xì)胞排列紊

5、亂，綠色反光組厚度均較白色反光組與光損傷組厚。第七天，第十四天，標(biāo)本內(nèi)外節(jié)分界較為清楚，內(nèi)節(jié)呈現(xiàn)絲狀排列，外核層與正常對(duì)照組相比稍變薄，細(xì)胞間排列緊密，但仍可見(jiàn)固縮細(xì)胞核，白色反光組約6-7個(gè)胞核厚度，光損傷組約7-9個(gè)胞核厚度，綠色反光組約9-10個(gè)胞核厚度。綠色反光組視網(wǎng)膜損傷程度相對(duì)于白色反光組各時(shí)間段損傷均較輕，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。各光損傷組視網(wǎng)膜MDA含量升高，SOD含量降低值，其中綠色反光組與白色反光組相比，

6、MDA含量明顯較低，而SOD活力明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01;P＜0.01);免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示，光照后細(xì)胞凋亡主要出現(xiàn)在外核層，視野中出現(xiàn)棕黃色陽(yáng)性染色的細(xì)胞核，24 h即一天達(dá)最大值，此后逐步下降，顏色隨之變淺，綠色反光組凋亡相關(guān)指標(biāo)c-fos的表達(dá)量也較白色反光組的大鼠低(P＜0.01)。
　　 結(jié)論: 與白色反光產(chǎn)生的光損傷相比較，綠色反光所產(chǎn)生的視網(wǎng)膜光損傷明顯降低;綠色反光可以對(duì)視網(wǎng)膜的光損傷起到減緩