番茄病程相關蛋白NP24的功能研究.pdf

1、植物病害問題是影響農作物產量和品質的一大難題。番茄作為世界上栽培最為普遍的果蔬之一，受病害影響也相當嚴重。傳統(tǒng)防治措施如改善栽培措施對防治病害的能力是有限的。而化學防治帶來環(huán)境污染問題，藥物殘留對人類健康也造成了潛在威脅。因此，通過轉基因手段獲得抗病能力強的番茄新品種，可以克服傳統(tǒng)育種周期長，物種隔離等問題，為番茄選育及種質資源的優(yōu)化開辟了新道路。NP24作為病程相關蛋白PR5家族中的一員，其生物學功能、植物抗病性分子機制、抗病防衛(wèi)基因

2、調控的研究較多，尤其是它們與植物抗病性的關系引起了強烈關注。因此對該基因的克隆和功能驗證將對番茄選育具有重要價值。本研究中以野生型番茄為材料，克隆了NP24基因，分析了它的組織表達模式，并利用生物學軟件分析及預測了它的生物學功能及進化關系。同時，構建了該基因的超表達載體和干擾載體，通過遺傳轉化分別獲得了超表達和干擾的轉基因株系。
　　本研究主要內容包括：⑴成功克隆NP24。NP24含有718個核苷酸的開放閱讀框，編碼247個氨基酸

3、，屬于PR5蛋白家族的類甜味蛋白。⑵組織和時空特異表達模式。利用RT-qPCR定量檢測了野生型番茄中不同組織器官[根（R）、莖（S）、葉（L）、花（FL）、果0（IM0）、果10（IM10）、果20（IM20）、果30（IM30）、綠熟（MG）、破色（Br）、橘黃果（YF）、紅果（RF）]中NP24的表達情況，結果表明該基因在根和果實中表達較高，破色期達到最高。⑶超表達及干擾轉基因植株的獲得。本研究成功構建了NP24超表達載體和干擾載體