壯藥扶芳藤對兔心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：在分子水平上研究壯藥扶芳藤的藥理作用，探討壯藥扶芳藤對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　方法：將48只新西蘭大白兔，體重在2.5-3Kg，按查隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F6組，每組8只。A.假手術(shù)組，B.模型對照組(I/R組)，C.卡托普利對照組，D.壯藥扶芳藤大劑量組（3.6g/kg.d）,E.壯藥扶芳藤中劑量組（1.8g/kg.d），F(xiàn).壯藥扶芳藤小劑量組（0.9g/kg.d）。（用藥劑量分別按

2、動物體表面積換算）。分籠飼養(yǎng)，自由飲食，于每天早上8點(diǎn)灌胃給藥，假手術(shù)組和模型對照組予蒸餾水灌胃。給藥7d，末次給藥1h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采用黃嘌呤氧化酶法測血清超氧化物歧化酶(SOD)活性，用硫代巴比妥酸法測丙二醛(MDA)含量。采用原位末端標(biāo)記法檢測心肌細(xì)胞細(xì)胞凋亡.采用免疫組化法檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)。以透射電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),重點(diǎn)觀察細(xì)胞膜、細(xì)胞核及線粒體等細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及其變化。
　　結(jié)果：(1

3、)I/R組在缺血30min及再灌注后SOD的活性顯著降低，MDA含量明顯增加，與A組比較差異有顯著性(P＜0.01)；與I/R組比較，C，D，E，F(xiàn)組在相應(yīng)時段均有明顯降低MDA含量及提高SOD活力的作用(P＜0.01)；在C、D、E、F四用藥組中，D組及F組與C組比較差異有顯著性(P＜0.05)。(2)缺血再灌注組心肌細(xì)胞嚴(yán)重水腫，部分肌節(jié)結(jié)構(gòu)破壞，肌絲斷裂、溶解，線粒體排列紊亂、腫脹，嵴部分?jǐn)嗔??？ㄍ衅绽M、壯藥扶芳藤大劑量組可以明

4、顯減輕缺血再灌注時心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損害，心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)形態(tài)較好，肌絲排列整齊，肌節(jié)明暗帶清晰可見，大部分細(xì)胞膜完整，核膜清楚，核仁明顯，線粒體排列較規(guī)整，外膜清晰，嵴排列較規(guī)則。提示壯藥扶芳藤的這種保護(hù)作用呈劑量依賴關(guān)系。(3) I/R組凋亡心肌細(xì)胞明顯增加,呈彌漫分布,凋亡細(xì)胞陽性指數(shù)高。假手術(shù)組偶見凋亡的心肌細(xì)胞。壯藥扶芳藤組和卡托普利組凋亡細(xì)胞呈散在分布,凋亡細(xì)胞陽性指數(shù)較I/R組低,而且劑量越高,凋亡細(xì)胞陽性指數(shù)越低。壯藥扶芳藤

5、大、中、小劑量組與卡托普利對照組比較，壯藥扶芳藤大劑量組與卡托普利組凋亡細(xì)胞陽性指數(shù)無顯著差異。假手術(shù)組中Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)量都較少,只有少數(shù)心肌著色。I/R組Bcl-2和Bax的表達(dá)量均有所上升,但以Bax蛋白表達(dá)更明顯。與I/R組比較,壯藥扶芳藤組Bcl-2表達(dá)顯著增高,而Bax蛋白顯著降低(P＜0.01),尤以大劑量組明顯。壯藥扶芳藤大、中、小劑量組與卡托普利對照組比較，壯藥扶芳藤大劑量組與卡托普利組在Bcl-2和Bax蛋