miR-10b、RHOC及相關(guān)基因在肝細(xì)胞癌中與轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)相關(guān)的病理學(xué)研究.pdf

1、目的:分析肝細(xì)胞癌中miR-10b、RHOC及相關(guān)基因的表達(dá)，探討這些基因參與肝細(xì)胞癌惡性生物學(xué)行為，及miR-10b可能參與調(diào)控RHOC轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)的機(jī)制。
　　 材料和方法:選取2000年1月至2005年12月在我院行手術(shù)切除的肝細(xì)胞癌病例，共375例，獲得隨訪(fǎng)信息185例。分析本組病例臨床病理特征及與預(yù)后的關(guān)系。留取2007～2008年間手術(shù)切除的新鮮肝細(xì)胞癌及癌旁肝組織標(biāo)本19例，Western blot檢測(cè)RHOC蛋白的表

2、達(dá)，免疫組化檢測(cè)cyclin D1、P21WAF1的表達(dá)，分析其相關(guān)性及與臨床病理特征的關(guān)系；選取有隨訪(fǎng)資料的病例80例，免疫組化檢測(cè)cyclin D1、P21WAF1、p53、ki-67及GPC3在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)，分析各基因表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系及各基因表達(dá)之間的相關(guān)性；Kaplan-Meier生存分析分析各基因表達(dá)的預(yù)后意義；COX風(fēng)險(xiǎn)模型分析各臨床病理特征及基因表達(dá)的預(yù)后意義。提取新鮮肝細(xì)胞癌及癌旁肝組織中的RNA，實(shí)時(shí)定量P

3、CR法檢測(cè)miR-10b和RHOC mRNA基因的表達(dá)，分析二者相關(guān)性及與臨床病理特征的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.本組資料顯示肝細(xì)胞癌發(fā)病年齡19～72歲，平均50.57±10.46歲，發(fā)病高峰年齡40～60歲，男女比例為10.7：1；HBsAg(+)87.4％，anti—HCV抗體(+)4.3％；術(shù)后3年生存率為52％，5年生存率為38％；腫瘤數(shù)目(p=0.000)、腫瘤大小(p=0.025)、組織學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)型(p

4、=0.000)、核分級(jí)(p=0.000)、分化程度(p=0.001)及血管浸潤(rùn)均(p=0.000)與預(yù)后明顯相關(guān)；其中組織學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)型中細(xì)梁狀型生存時(shí)間與致密梁狀型和腺樣型無(wú)明顯區(qū)別(p>0.05)而明顯高于粗梁狀型、實(shí)性型和硬化型(p≤0.009)，硬化型生存時(shí)間與實(shí)性型之間無(wú)明顯區(qū)(p>0.05)而明顯低于其余各型(p≤0.006)；核分級(jí)1級(jí)與2級(jí)生存時(shí)間無(wú)明顯區(qū)別(p>0.05)，核分級(jí)3級(jí)與4級(jí)生存時(shí)間無(wú)明顯區(qū)別(p>0.05)

5、，而核分級(jí)3級(jí)生存時(shí)間明顯低于2(p=0.000)：小細(xì)胞型、巨細(xì)胞型和梭形細(xì)胞型主要由實(shí)性型和粗梁狀型組織學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)型構(gòu)成，明顯不同于透明細(xì)胞型(主要由細(xì)梁狀型和粗梁狀型構(gòu)成)(p≤0.006)。
　　 2.Western blot顯示9/19例肝細(xì)胞癌中RHOC蛋白高表達(dá)，與血管浸潤(rùn)明顯相關(guān)(p=0.020)。RHOC陽(yáng)性表達(dá)與cyclin D1陽(yáng)性表達(dá)明顯正相關(guān)(P=0.010)；cyclin D1陽(yáng)性表達(dá)與高核分級(jí)明顯相關(guān)

6、(p=0.041)；p21WAF1及p53陽(yáng)性表達(dá)均與分化程度(分別為p=0.032，p=0.031)和血管浸潤(rùn)(p=0.036，p=0.011)正相關(guān)；ki67陽(yáng)性表達(dá)與分化程度(p=0.004)、核分級(jí)(p=0.045)和血管浸潤(rùn)(p=0.001)正相關(guān)；GPC3表達(dá)與腫瘤數(shù)目(p=0.038)和分化程度(p=0.013)正相關(guān)。生存分析顯示cyclin D1及ki67有明顯預(yù)后意義。ki67陽(yáng)性表達(dá)與p53(p=0.000)及p2

7、1WAF1(p=0.047)陽(yáng)性表達(dá)有明顯相關(guān)性，其他各基因之間表達(dá)無(wú)明顯關(guān)系。
　　 3.COX回歸模型分析顯示腫瘤大小(p=0.042)、腫瘤數(shù)目(p=0.004)及血管浸潤(rùn)(p=.000)為獨(dú)立預(yù)后因素。
　　 4.與癌旁肝組織相比，miR-10b在肝細(xì)胞癌中的平均表達(dá)增高(p=0.049)，但miR-10b低表達(dá)組血管浸潤(rùn)明顯高于高表達(dá)組(P=0.020)；與癌旁肝組織相比，RHOC mRNA在癌組織中的表達(dá)增高

8、(P=0.032)，同時(shí)RHOCmRNA高表達(dá)組血管浸潤(rùn)明顯高于低表達(dá)組(P=0.041)。miR-10b和RHOc mRNA的表達(dá)未發(fā)現(xiàn)有明顯相關(guān)性。
　　 結(jié)論
　　 1.除腫瘤大小、腫瘤數(shù)量、分化程度、血管浸潤(rùn)以外，肝細(xì)胞癌組織學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)型和核分級(jí)均有明顯預(yù)后意義。
　　 2.miR-10b、RHOC、cyclin D1、ki67及GPC3均參了與肝細(xì)胞癌的生物學(xué)進(jìn)程；RHOC可能參與了細(xì)胞周期調(diào)控。cycl