清肺化痰通絡(luò)方對博萊霉素誘發(fā)大鼠肺損傷的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)采用名老中醫(yī)邱幸凡教授的臨床經(jīng)驗(yàn)方——“清肺化痰通絡(luò)方”，借鑒博菜霉素(BLMA5)誘發(fā)大鼠肺纖維化模型，探討該方對該模型早期急性肺泡炎和繼發(fā)肺纖維化(PF)的防治作用及機(jī)制。 方法：Wistar大鼠72只，隨機(jī)分為對照組、模型組和中藥組三組：模型組和中藥組采用氣管內(nèi)灌注BLMA5復(fù)制大鼠PF模型；中藥組于造模后2小時以清肺化痰通絡(luò)方水煎劑灌胃，對照組、模型組同時以等容積生理鹽水灌胃，每天1次；造模后第3、7、14、

2、28天分別頸動脈放血處死三組動物各6只，取肺組織制作常規(guī)石蠟切片：HE染色觀察肺組織病變特點(diǎn)；MASSON染色觀察肺組織纖維化程度；免疫組織化學(xué)Sp法測定轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白在肺內(nèi)的表達(dá)。 結(jié)果：1、肺組織炎癥反應(yīng)及纖維化的變化過程：采用HE和MASSON染色觀察，對照組大鼠肺組織內(nèi)未見明顯異常。模型組和中藥組大鼠第3、7天，肺組織表現(xiàn)為明顯的急性炎

3、癥反應(yīng)；第14天炎癥減輕，膠原沉積增加；第28天時肺組織結(jié)構(gòu)破壞，肺泡腔明顯縮小，肺間質(zhì)部分被膠原纖維和成纖維細(xì)胞替代，形成彌漫性肺纖維化的動態(tài)變化過程。中藥組的肺泡炎和肺纖維化程度較同一天模型組的病變輕微，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 2、肺組織中TGF-β1的表達(dá)：采用免疫組織化學(xué)Sp法觀察，可見對照組大鼠少數(shù)細(xì)支氣管粘膜上皮細(xì)胞的胞漿有TGF-β1弱表達(dá)。模型組和中藥組大鼠支氣管、細(xì)支氣管粘膜上皮細(xì)胞的TGF-β1表

4、達(dá)則更明顯和范圍更廣：特別是在第7天，肺泡腔和間質(zhì)中出現(xiàn)大量的TGF-β1強(qiáng)陽性的肺泡巨噬細(xì)胞；第14、28天時，在肺泡腔和間質(zhì)中仍然有TGF-β1陽性的肺泡巨噬細(xì)胞存在。中藥組的TGF-β1表達(dá)明顯少于同一天模型組，在第7、14天時差別有顯著意義(P＜0.01)。 3、肺組織中MMP-2的表達(dá)：采用免疫組織化學(xué)Sp法觀察，可見對照組大鼠肺組織中肺泡上皮細(xì)胞無MMP-2表達(dá)。模型組和中藥組大鼠在第7天，肺組織中MMP-2表達(dá)明顯

5、增強(qiáng)，除肺泡上皮細(xì)胞、細(xì)支氣管上皮細(xì)胞外，還可見大量肺泡巨噬細(xì)胞有所表達(dá)；第28天，其MMP-2表達(dá)比第7天時明顯減弱，但仍高于同天對照組。同一天模型組肺組織中MMP-2的表達(dá)明顯多于中藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 4、肺組織中iNOS的表達(dá)：采用免疫組織化學(xué)Sp法觀察，對照組大鼠肺間質(zhì)內(nèi)偶見肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)iNOS蛋白弱陽性表達(dá)。模型組、中藥組大鼠在第3、7、14天時，肺間質(zhì)iNOS陽性的細(xì)胞表達(dá)明顯增多，其中第7天