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1、目的:以復(fù)制缺陷的腺病毒為載體,細(xì)菌內(nèi)同源重組法構(gòu)建載有npcl基因的腺病毒載體并初步鑒定.以用于Niemann Pick's type c的基因治療.方法:利用限制內(nèi)切酶kpn1及HindⅢ從帶有朊病毒啟動子的質(zhì)粒Prp-pro-mnpc1中切下目的的基因npc-1,克隆至空梭質(zhì)粒Padtrack-CMV,再與Padeasy-1在大腸桿菌BJ5183中進(jìn)行同源重組,經(jīng)抗性篩選和酶切鑒定的質(zhì)粒利用脂制體轉(zhuǎn)染人293細(xì)胞中擴(kuò)增,利用Ade
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