重組人骨保護蛋白治療多發(fā)性骨髓瘤骨病的實驗研究.pdf

1、多發(fā)性骨髓瘤(MM)以骨髓中出現(xiàn)無限擴增的異常漿細胞為主要病理特征。其突出的臨床特點之一就是進行性的骨質(zhì)破壞引起的骨髓瘤骨病，包括溶骨性骨破壞、病理性骨折、高鈣血癥和彌漫性骨質(zhì)疏松。MM骨病的主要原因是破骨細胞活性增強，而不伴有相應(yīng)的成骨細胞活性的增加，導致骨吸收增加。漿細胞與骨髓微環(huán)境的相互作用是破骨細胞激活的關(guān)鍵。 最近的研究證實RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)是調(diào)節(jié)破骨細胞(OC)形成和功能的關(guān)鍵。RANKL主要表達于骨髓

2、微環(huán)境中的基質(zhì)細胞和成骨細胞。RANKL與RANK在破骨細胞分化和骨吸收方面起關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用。破骨細胞前體細胞和破骨細胞表面RANK分子一旦與RANKL結(jié)合，其分化、擴增明顯加快，活性明顯增強。OPG是一種誘騙受體，與RANKL結(jié)合后，可以阻斷RANKL與RANK結(jié)合，抑制OC的分化與成熟。 在與成骨細胞前體或骨髓基質(zhì)細胞共同培養(yǎng)時，骨髓瘤細胞可以上調(diào)RANKL表達，并下調(diào)OPG表達。骨髓活組織檢查證實RANKL表達增高，可能是

3、因為骨髓基質(zhì)細胞，成骨細胞和激活的T淋巴細胞過度表達RANKL所致。就骨髓瘤細胞是否能夠直接表達RANKL，目前還有爭論：一些研究者認為MM細胞本身不能直接表達RANKL，也不能產(chǎn)生sRANKL。此外，微陣列技術(shù)技術(shù)并不能檢測到骨髓瘤細胞上有RANKL基因表達。然而，其他研究結(jié)果卻表明MM細胞能夠直接表達RANKL。 在體外實驗中，本課題通過建立小鼠骨髓瘤細胞系SP2/0與破骨細胞前體細胞RAW264.7混合培養(yǎng)體系來探討骨髓瘤

4、骨病的發(fā)病機制，結(jié)果表明：新的混合培養(yǎng)體系不需要特殊的誘導劑就可以誘導破骨細胞前體分化為成熟的破骨細胞。應(yīng)用重組人骨保護蛋白rhOPG-Fc可以抑制破骨細胞前體細胞分化，有效地抑制成熟破骨細胞的骨吸收功能。間接證明了小鼠骨髓瘤細胞系SP2/0能夠分泌RANKL。 在骨髓瘤動物實驗中，本研究通過隨機分組對照，測量了血、尿骨轉(zhuǎn)換生化指標、DXA骨密度和CT值骨量測定、腰椎和股骨生物力學檢測、病理組織形態(tài)學及骨形態(tài)計量學測定，結(jié)果顯示

5、應(yīng)用rhOPG-Fc可有效抑制骨髓瘤小鼠的骨丟失。藥物的治療效果與用藥時間及劑量有關(guān)。理想的用藥方式應(yīng)該是用藥持續(xù)時間2周，用藥劑量為6mg/kg/d。 總的來說，本研究表明：骨髓瘤細胞能夠分泌RANKL，進而直接誘導破骨細胞前體分化為成熟的破骨細胞。這一誘導作用可以被rhOPG-FC抑制。rhOPG-Fc能夠改善骨髓瘤小鼠的溶骨性骨病。而且藥物的治療效果與用藥時間及劑量有依賴關(guān)系。理想的用藥時間為2周，用藥劑量為6mg/kg/