AnnexinⅠ在胰腺癌發(fā)生過程中的功能研究.pdf

1、　　胰腺癌作為一種發(fā)病率逐年上升的常見惡性腫瘤，因其缺乏特異性癥狀而早期診斷困難，兼之惡性程度高，對現(xiàn)有治療方法無滿意療效，預(yù)后極差。尋找新的治療靶標(biāo)及診斷標(biāo)志是解決上述問題的根本途徑。胰腺癌的發(fā)生也是一種多因素作用，多基因參與，多階段形成的復(fù)雜病理過程。癌基因與抑癌基因的相互作用在腫瘤的形成過程中起到了關(guān)鍵作用。AnnexinⅠ是鈣磷脂結(jié)合蛋白Annexin超家族的成員之一，在信號傳導(dǎo)、DNA復(fù)制、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞黏附、細(xì)

2、胞凋亡、胞吐、鈣離子通道的形成等眾多的生理過程中發(fā)揮重要作用。而信號傳導(dǎo)異常和細(xì)胞周期的紊亂導(dǎo)致細(xì)胞的惡性增殖?！　”卷?xiàng)研究通過對胰腺癌組織中AnnexinⅠ的免疫組化法檢測證實(shí)了其在胰腺癌組織中的表達(dá)顯著升高，可以作為備選的胰腺癌診斷標(biāo)志物之一?！　檫M(jìn)一步明確AnnexinⅠ在胰腺癌發(fā)生過程中所起的作用，本項(xiàng)研究篩選了該基因高表達(dá)的兩個(gè)胰腺癌細(xì)胞系，Aspc-1和SuitⅡ。將AnnexinⅠ基因mRNA開放閱讀框區(qū)域作為作用靶

3、點(diǎn)，合成了3個(gè)該基因的小分子RNA干擾片斷(siRNA)及1個(gè)無關(guān)序列，并構(gòu)建了RNA干擾片斷的重組真核表達(dá)載體，即pSilencerTM-AnnexinlsiRNA1-3、pSilencerTM-AnnexinlsiRNAN，分別將上述4種重組真核載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞。通過RNA干擾(RNAi)的方法靜默AnnexinⅠ基因在mRNA水平的表達(dá)。通過RT-PCR、Westen印記法、免疫細(xì)胞化學(xué)、MTT法、流式細(xì)胞技術(shù)在證實(shí)Anne