防風及其近緣種的DNA指紋分析及質(zhì)量相關研究.pdf

1、該實驗應用RAPD及ISSR分子標記,對來源于黑龍江、河北、陜西、四川、甘肅的五個防風及其近緣種共38分樣本進行了DNA指紋分析.從100個RAPD引物和32個ISSR引物中分別篩選出21、6個擴增結果穩(wěn)定、擴增條帶清晰的引物.其中,8個RAPD引物和3個ISSR引物擴增出的帶可以將防風及其近緣種區(qū)分開.用篩選出的引物對所有樣本進行PCR擴增,得到DNA指紋圖,從DNA指紋圖中可見不同品種之間僅有少數(shù)引物得到可以明確區(qū)分它們的不同條帶.

2、同時對電泳條帶進行基于遺傳相似度的聚類分析可將5類38份材料分為三類:第一類包括竹節(jié)防風、前胡,第二類包括硬苗防風、葛縷子,第三類為正品防風.前兩類之間的遺傳相似度范圍為0.77~0.80,正品防風和這二者之間的遺傳相似度范圍為0.72~0.75.不同品種之間的遺傳相似度范圍顯示了正品防風與其他防風近緣種或混偽品之間的遺傳距離,以及防風近緣種之間的遺傳相似性,但也說明正品防風與其他防風近緣種或混偽品遺傳相似度比較低,具有比較遠的親緣關系

3、.在藥物有效成分含量分析方面,該文采用《中華人民共和國藥典》中規(guī)定的高效液相色譜法對所有樣本進行了防風升麻苷的含量測定.同時,嘗試使用了先進的毛細管電泳法.《中華人民共和國藥典》中規(guī)定防風中色原酮類成分的含量不可低于0.308﹪,產(chǎn)地黑龍江富裕的正品防風的有效成分升麻苷的含量為0.842﹪~0.864﹪明顯高于其他如硬苗防風(河北0.159﹪~0.163﹪)、竹節(jié)防風(四川0.350﹪~0.411﹪)、前胡(陜西0.473﹪~0.590