三種中藥有效成分對小鼠2-細(xì)胞胚胎體外培養(yǎng)抗氧化作用及冷凍胚胎移植效果研究.pdf

1、本研究主要探討mCZB分別添加黃芩苷(Baicalin，Bai)、川芎嗪(Ligustrazine，Lig)、小檗堿(Berberine，BR)對小鼠2-細(xì)胞胚胎體外發(fā)育抗氧化作用的影響，并比較各組胚胎冷凍解凍效果及冷凍胚胎移植妊娠率和產(chǎn)仔率等，以進(jìn)一步探討利用三種中藥有效成分改善小鼠早期胚胎體外培養(yǎng)微環(huán)境、提高體外培養(yǎng)胚胎質(zhì)量和移植胚胎的發(fā)育潛力，為更好地改進(jìn)哺乳動(dòng)物胚胎培養(yǎng)液成分和培養(yǎng)條件提供可借鑒的資料和途徑。 試驗(yàn)一：以

2、mCZB添加抗生素為對照組，分別添加4μg/mlBai、0.5μg/mlLig和0.1μg/mlBR為試驗(yàn)組，比較各組胚胎孵化率、微滴中一氧化氮(Nitricoxide，NO)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量及孵化胚胎的細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果：各試驗(yàn)組胚胎孵化率，Bai組(80.2％，81.3％)、Lig組(78.9％，77.6％)及BR組(76.7％，71.6％)極顯著高于對照組(50.7％，47.8％)(P＜0.01)

3、。各組間NO含量，72h較24h均有減少，而120h又均有增加且最高。各組間MDA含量，72h和120h與24h比較呈現(xiàn)增加趨勢，除120hBai組，對照組均高于試驗(yàn)組。孵化胚胎細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，BR組、Lig組和Bai組(87.2±8.6，83.9±7.7，81.9±6.2)與對照組(77.4±5.6)差異極顯著(P＜0.01)。表明，三種中藥有效成分均能顯著促進(jìn)小鼠早期胚胎體外發(fā)育及胚胎細(xì)胞增殖，并對NO和MDA含量有一定影響。

4、 試驗(yàn)二：以試驗(yàn)一為基礎(chǔ)，2-細(xì)胞胚胎體外培養(yǎng)至桑椹、囊胚期進(jìn)行常規(guī)冷凍，比較各組胚胎冷凍解凍效果及兩種程序?qū)ε咛ダ鋬鼋鈨龅挠绊?。結(jié)果：冷凍解凍桑椹胚體外培養(yǎng)8～14h囊胚發(fā)育率，程序一中Bai組(65.8％)顯著高于對照組(48.6％)和BR組(46.7％)(P＜0.05)，Lig組(81.1％)極顯著高于對照組(48.6％)和BR組(46.7％)(P＜0.01)；程序二中Bai組(80.6％)、Lig組(78.3％)極顯著高于對

5、照組(55.2％)和BR組(47.6％)(P＜0.01)。冷凍解凍囊胚體外培養(yǎng)6～8h囊胚發(fā)育率，程序一中各組間無顯著差異(P＞0.05)；程序二中，中藥有效成分各組間差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于對照組(61.2％)(P＜0.05)。兩種冷凍程序冷凍效果差異不顯著(P＞0.05)。表明，添加Bai、Lig對提高胚胎體外發(fā)育質(zhì)量效果明顯，顯著提高了冷凍胚胎發(fā)育率。 試驗(yàn)三：以試驗(yàn)二為基礎(chǔ)，將各組冷凍解凍胚胎培養(yǎng)發(fā)育至囊