小鼠胚胎冷凍的研究.pdf

1、隨著生命科學的發(fā)展,作為研究生命科學基礎條件之一的實驗動物也在中國得到長足的發(fā)展.目前,全世界僅實驗小鼠、遺傳工程小鼠的品種、品系就有6000多種,并且每年以600—800種的速度在增加,中國為了與世界生命科學接軌,現(xiàn)正建設《國家遺傳工程小鼠資源庫》,引進和開展這些珍貴的實驗動物,為了使這些珍貴的實驗動物品種得以安全的保存,建立一種快速、經(jīng)濟、可靠的小鼠種質保存方法尤為重要.而胚胎冷凍保種技術是目前小鼠保種技術中最為成功的一項技術.該文

2、以EG40、ES40、EFS40為冷凍液,采用快速冷凍法、下班化冷凍法,用ICR小鼠對小鼠胚胎冷凍的條件進行了系統(tǒng)的探索,除用冷凍麥管進行冷凍外,首次用細胞冷凍管進行胚胎冷凍.EG40、ES40冷凍液進行胚胎快速冷凍,解凍后胚胎囊胚發(fā)育率可達56.4％、66.7％,胚胎移植著床率為41.4％、50％,用EFS40為冷凍液的進行玻璃化冷凍,解凍后囊胚發(fā)育率達87.2％,著床率為66.3％,與對照組差異不明顯.用EFS40玻璃化冷凍液并用細

3、胞冷凍管代替麥管進行胚胎冷凍,其結果與麥管法無差異.作者對一步法和二步法冷凍方法進行了比較,EG40、ES40冷凍液二步法冷凍效果比一步法好,差異顯著;而EFS40玻璃化冷凍液二步法冷凍效果與一步法相比無差異.在此基礎上,用冷凍麥管、細胞冷凍管分別采用一步法、二步法對Lats基因敲除小鼠胚胎進行玻璃化冷凍,胚胎解凍后,囊胚發(fā)育率分別為:90％、90.1％、89.2％、91.4％;移植后著床率分別:50.0％、47.1％、43.4％、46