應答蛋白基因表達在鎘接觸中作為生物標志物的研究.pdf

1、本文應用逆轉錄多聚酶聯(lián)反應(RT-PCR)和免疫印跡(Westernblot)觀察鎘對人胚腎細胞的MT亞型和HO-1mRNA和蛋白的誘導表達作用。同時也觀察鎘對體外培養(yǎng)的人淋巴細胞MT各亞型的誘導表達作用。并在職業(yè)性鎘接觸人群中檢測其變化，初步探討其在鎘接觸中作為生物標志物的可行性。并應用適用于人群研究實時熒光定量RT-PCR方法，測定鎘接觸人群中外周血淋巴細胞的MT-1AmRNA的表達水平。結果提示鎘誘導人胚腎細胞MT亞型和HO-1m

2、RNA和蛋白表達規(guī)律一致，其誘導調控在轉錄水平，mRNA的表達水平能很好的反映鎘接觸水平。人群研究顯示MT亞型mRNA表達水平與其鎘接觸水平呈現(xiàn)出良好的劑量-效應關系，提示這些基因的表達可反映鎘接觸水平，可作為鎘接觸的生物標志物。結果還顯示MT-1A基礎表達水平的改變隨尿鎘的增高而增高，且與反映腎功能指標顯著相關，提示其可作為鎘致腎損害效應的生物標志物。以靶分子效應指標(應答蛋白基礎表達水平)和靶器官效應指標(尿蛋白)計算鎘接觸的BMD

3、L值的結果顯示，計算血鎘BMDL值時，MT-1A，1F的基礎表達改變的臨界值改變低于HO-1的基礎表達改變，提示MT可作為鎘接觸生物標志物較HO-1敏感；計算血鎘、尿鎘BMDL值時，靶分子應答蛋白基礎表達水平均低于靶器官腎功能改變的臨界值，提示靶分子的改變早于靶器官的改變，在鎘接觸中用靶分子作為生物標志物似乎更敏感。應用實時熒光定量RT-PCR測定鎘接觸中MT-1A的表達與傳統(tǒng)RT-PCR結果一致，提示可用這種方法進行大樣本人群研究。但