大鼠凍存卵巢組織自體異位移植后長期功能評估.pdf

1、目的：評估成年雌性Wistar大鼠凍存卵巢組織自體異位移植后的長期生殖、內分泌功能。 方法：將78只健康、存在規(guī)律動情周期的性成熟雌性Wistar大鼠，按隨機數字表法分為假手術組（1組，15只）、新鮮組織移植組（2組，24只）、凍存組織移植組（3組，24只）和去勢組（4組，15只）。1組：僅行假手術，常規(guī)麻醉后切開大鼠皮膚、肌肉，保留卵巢，依次縫合肌肉、皮膚；2組：切除大鼠雙側卵巢，將卵巢用生理鹽水沖洗干凈后平均切為8塊，每塊組

2、織塊體積約為1mm×2mm×2mm。隨機取6塊新鮮卵巢組織自體異位多點移植于每側腎被膜下；3組：切除大鼠雙側卵巢，將每側卵巢用生理鹽水沖洗干凈后平均切為8塊，采用玻璃化冷凍方法冷凍保存，做好標記。2～4周后將凍存卵巢組織復蘇，隨機取6塊自體卵巢組織塊多點移植于每側腎被膜下；4組：切除大鼠雙側卵巢，作為去勢對照組。術后定期行陰道沖洗術，檢查陰道脫落細胞直至有典型角化細胞出現。分別于移植后5、8、10個月隨機抽取各處理組1/3數量動物，結合

3、陰道細胞學檢查在大鼠動情期從其頸靜脈抽血監(jiān)測血清雌、孕激素水平，評估移植后卵巢組織的生殖內分泌功能。大鼠處死后取其卵巢及子宮，稱量子宮濕重、做卵巢及子宮組織切片。通過光鏡下行組織學觀察，計數各級卵泡數目，反映移植后卵巢組織存活及卵泡生長發(fā)育情況。 結果：所有動物模型中，新鮮及凍存卵巢組織異位移植后都可觀察到存活組織塊，組織塊表面肉眼可見有新生血管覆蓋。2、3組大鼠卵巢移植術后陰道細胞學檢查均有典型角化細胞出現。2、3組大鼠動情期

4、血清雌、孕激素水平與假手術組無顯著性差異（P>0．05），且均明顯高于去勢組（P<0．01）。移植后凍存卵巢組織與新鮮卵巢組織光鏡下均可觀察到各級卵泡及黃體存在。冷凍復蘇后組織與新鮮組織各級卵泡構成比無顯著性差異（P>0．05）。從2、3組取得的移植后卵巢組織中均存在各級卵泡，其各級卵泡構成比與同期1組大鼠卵巢組織相比均無顯著性差異（P>0．05）。與冷凍復蘇后組織相比，3組大鼠分別在移植后5、8、10個月取得的卵巢組織中各級卵泡構成比