RNA干擾對胃癌MGC803細胞E2F-1基因表達及其生物學行為的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討小分子干擾RNA(siRNA)對胃癌MGC803細胞E2F-1基因表達及其生物學行為的影響。 方法：用LipofectamineTM2000把E2F-1-siRNA(實驗組)和negative control-siRNA(陰性對照組)轉(zhuǎn)染MGC803細胞，轉(zhuǎn)染48h后，采用實時定量PCR(Real-time quantitative PCR)及蛋白印跡(western blotting)技術(shù)分別檢測E2F-1 mRNA

2、及蛋白的表達，四唑鹽(MTT)法檢測MGC803細胞增殖的變化，流式細胞儀檢測MGC803細胞周期變化。應(yīng)用體外侵襲實驗及克隆實驗分別檢測E2F-1-siRNA對胃癌MGC803細胞侵襲力和增殖力的影響。 結(jié)果：E2F-1-siRNA和陰性對照siRNA由脂質(zhì)體介導成功轉(zhuǎn)染胃癌MGC803細胞，E2F-1-siRNA有效抑制了胃癌細胞E2F-1 mRNA的表達，與陰性對照組及未轉(zhuǎn)染組細胞比較分別降低了84.8％和85.3％(P<

3、0.05)：E2F-1-siRNA抑制胃癌MGC803細胞E2F-1蛋白的表達，與陰性對照組及未轉(zhuǎn)染組細胞比較降低了77.2％和78.6％；E2F-1-siRNA抑制MGC803細胞的增殖，與陰性對照組和未轉(zhuǎn)染組比較增殖分別抑制了69％和81.6％，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；E2F-1-siRNA促使更多MGC803細胞DNA含量聚集于G2/M期附近，G2/M期DNA含量比例為(54.98±3.46)％，與陰性對照組(44.70

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