版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、天然多糖具有親水、安全、穩(wěn)定、無毒、生物可降解性、自然界存在廣泛、易制備和價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn);同時(shí),多糖分子鏈有較多不同種類的基團(tuán),經(jīng)化學(xué)和生化方法修飾,可獲得相應(yīng)的功能化多糖衍生物。因此,應(yīng)用多糖及其衍生物作為藥物載體的研究報(bào)告日益增多。普魯蘭多糖具有水溶性、無毒、多羥基易化學(xué)修飾和缺少免疫原性等優(yōu)點(diǎn),可做藥物載體。內(nèi)源性膽固醇分子具有環(huán)狀結(jié)構(gòu),導(dǎo)致分子有一定的疏水性。而選擇人體內(nèi)源性小分子琥珀酸為連接臂代替文獻(xiàn)報(bào)道的1,6—己二異氰酸酯
2、,將膽固醇接枝到普魯蘭多糖分子鏈上,獲得新型安全的兩親性膽固醇基普魯蘭(CHSP),此方法也為膽固醇基普魯蘭的合成提供了新策略。本研究具體內(nèi)容如下: ⑴合成新型兩親性膽固醇基普魯蘭(CHSP)、膽固醇基羧甲基普魯蘭(CHS—CMP)和FITC標(biāo)記的CHSP(FITC—labeled CHSP)的普魯蘭糖衍生物。用紅外(FT—IR)、核磁共振(NMR)、粉末晶體衍射(XRD)、差示掃描量熱儀(DSC)、紫外—可見分光光度計(jì)和熒光分
3、光光度計(jì)對(duì)合成普魯蘭衍生物進(jìn)行表征。通過FT—IR、NMR、XRD和DSC實(shí)驗(yàn)證明,合成了兩親性膽固醇基普魯蘭。用NMR法和硫酸銨比色法計(jì)算系列CHSP的膽固醇取代度,每100糖單元取代3.87~5.70個(gè)膽固醇。采用琥珀酸連接臂,合成膽固醇基羧甲基普魯蘭(CHS—CMP),并對(duì)其中間體和CHS—CMP材料進(jìn)行FT—IR和1H NMR表征。以CHSP和FITC為原料,在二月桂酸二丁基錫(DBTDL)催化下,合成FITC—labeled
4、CHSP并經(jīng)FT—IR和1H NMR表征,通過NMR和熒光分光光度法計(jì)算衍生物的FITC取代度,每100糖單元取代4.3個(gè)FITC。 ⑵通過溶脹超聲法或透析法制備CHSP和FITC—labeled CHSP自聚集水凝膠納米粒。用1H NMR、動(dòng)態(tài)激光散射(DLS)、透射電鏡(TEM)和穩(wěn)態(tài)熒光探針法對(duì)CHSP納米粒物化性質(zhì)進(jìn)行表征。由于CHSP材料的膽固醇取代度不同,獲得粒徑在51.8~73 nm自聚集水凝膠納米粒。CHSP分子
5、結(jié)構(gòu)中無極性取代基,其納米粒在蒸餾水中的zeta電位絕對(duì)值近似為零。而CHSP材料的臨界聚集濃度(cac)的大小直接與膽固醇取代度有關(guān),當(dāng)膽固醇取代度增大,cac濃度減小。采用透析法可制備粒徑在50nm左右的FITC—labeled CHSP自聚集納米粒。 ⑶載藥CHSP和載藥FITC—labeled CHSP自聚集納米粒的制備。用動(dòng)態(tài)激光散射(DLS)、透射電鏡(TEM)、紫外—可見分光光度計(jì)(UV—Vis)、XRD粉末晶體衍
6、射和差示掃描量熱(DSC)對(duì)載藥納米粒進(jìn)行表征。以米托蒽醌(MTO)作為抗瘤模型藥物,用透析法制備CHSP載藥納米粒。動(dòng)態(tài)光散射測(cè)得載藥納米粒的粒徑為153.1~174.2 nm。UV—Vis法檢測(cè)載藥納米粒的包封率為83.3~91.7%,載藥量為4.35%~14.29%。透射電鏡下觀察,載藥CHSP納米粒為規(guī)則的球形。隨著CHSP材料膽固醇取代度增大,納米粒的載藥量和包封率均增大。對(duì)照MTO藥物晶體衍射峰,載藥CHSP納米粒的MTO藥
7、物的晶體峰消失,XRD結(jié)果表明,負(fù)載的MTO包入納米粒內(nèi)部。DSC實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣證明這一結(jié)論。載藥CHSP納米粒的體外釋放顯示,MTO釋放與釋放介質(zhì)的pH有關(guān),pH低的釋放介質(zhì)藥物釋放快。但在pH6.8或7.4釋放介質(zhì)中,能緩慢釋放MTO。藥物釋放與載體CHSP的膽固醇取代度有關(guān),取代度越大,載藥納米粒緩釋效果越明顯。采用離子梯度法,用CHSP納米粒包載強(qiáng)熒光性的表阿霉素(EPI),與包載MTO的CHSP納米粒相比,包載EPI納米粒的載藥
8、量和包封率都偏低。用透析法制備了負(fù)載EPI的FITC—labeled CHSP納米粒。 ⑷CHSP自聚集納米粒、載藥CHSP自聚集納米粒和載藥FITC—labeled CHSP納米粒的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)。采用MTT、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。向HeLa腫瘤細(xì)胞中加入高達(dá)200μg/mL的CHSP自聚集水凝膠納米粒的培養(yǎng)基,此濃度的CHSP納米粒對(duì)共孵育的HeLa細(xì)胞的生長無抑制作用;無論是MTO還是EPI載藥納米
9、粒,當(dāng)載藥納米粒中藥物濃度在1~10μg/mL,均顯示出對(duì)HeLa細(xì)胞的毒性。將相同藥物濃度的載藥CHSP納米粒和藥物溶液的培養(yǎng)基加入HeLa細(xì)胞中,共孵育相同時(shí)間,載藥納米粒對(duì)腫瘤細(xì)胞生長抑制作用強(qiáng)于游離藥物。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明,腫瘤細(xì)胞對(duì)于載藥納米粒吞噬作用強(qiáng)于游離藥物。激光共聚焦顯微鏡下觀測(cè)的結(jié)果同樣證明這一結(jié)論。為了觀測(cè)CHSP材料自聚集水凝膠納米粒進(jìn)入HeLa細(xì)胞的情況,選擇50 nm左右的FITC—labeled CHS
10、P自聚集水凝膠納米粒與HeLa細(xì)胞共孵育,隨孵育時(shí)間延長,在激光共聚焦顯微鏡下可觀測(cè)到納米粒由粘附于腫瘤細(xì)胞膜,逐漸進(jìn)入細(xì)胞漿,直到最后分布包括細(xì)胞核在內(nèi)的整個(gè)細(xì)胞。而觀測(cè)負(fù)載表阿霉素的FITC—labeled CHSP納米粒與HeLa細(xì)胞共孵育2h的照片,發(fā)現(xiàn)藥物和CHSP納米粒均可進(jìn)入腫瘤細(xì)胞核。 ⑸負(fù)載表阿霉素CHSP自聚集水凝膠納米粒的wistar大鼠藥代實(shí)驗(yàn)初步研究。采用高效液相法檢測(cè)不同時(shí)間游離EPI和載藥的CHSP
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 膽固醇改性普魯蘭多糖自組裝載藥納米粒子的研究.pdf
- 生育酚改性普魯蘭自組裝納米膠束用于抗癌藥物的傳遞.pdf
- 腫瘤靶向性普魯蘭基自組裝納米藥物載體的研究.pdf
- 載藥乙酰化普魯蘭納米粒子的制備及性能評(píng)價(jià).pdf
- 亞油酸修飾的普魯蘭自組裝膠束作為藥物載體的研究.pdf
- 普魯蘭的發(fā)酵及改性研究.pdf
- 速溶普魯蘭多糖顆粒的制備.pdf
- 親水納米粒子的疏水化改性及其應(yīng)用.pdf
- 高產(chǎn)普魯蘭多糖發(fā)酵工藝優(yōu)化及其結(jié)構(gòu)分析.pdf
- 阿霉素激發(fā)人源α-螺旋肽自組裝載藥納米的構(gòu)建.pdf
- 靜電紡制備普魯蘭多糖納米纖維及交聯(lián)機(jī)理研究.pdf
- 基于疏水化修飾羧甲基殼聚糖自組裝納米粒的制備及應(yīng)用.pdf
- 基于普魯蘭多糖的納米藥物遞送系統(tǒng)靶向抗肝癌作用研究.pdf
- 貴金屬納米粒子的可控自組裝及其應(yīng)用研究.pdf
- 聚多糖納米粒及其改性材料的結(jié)構(gòu)與性能研究.pdf
- 普魯蘭多糖高產(chǎn)菌株Y68多糖發(fā)酵生產(chǎn)及其機(jī)理初步研究.pdf
- 改性殼聚糖納米粒的制備及其載藥釋藥研究.pdf
- 神經(jīng)毒素自組裝納米粒的制備及其腦內(nèi)藥動(dòng)-藥效學(xué)研究.pdf
- 疏水改性多糖及其葉酸偶合體作為納米藥物載體的研究.pdf
- 疏水改性葡聚糖-聚乳酸體系自組裝行為的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論