原發(fā)性腎病綜合征HLA-A、B、DR基因頻率的研究.pdf

1、目的：為了了解HLA-A、B、DR位點(diǎn)的基因多態(tài)性與原發(fā)性腎病綜合征的聯(lián)系關(guān)系，尋找原發(fā)性腎病綜合征的HLA的易感基因及山西省部分原發(fā)性腎病綜合征患者出現(xiàn)的基因頻率的變化規(guī)律，研究原發(fā)性腎病綜合征患者的病因及致病機(jī)理，我們選取了山西漢族30例原發(fā)性腎病綜合征患者及45例漢族健康人的DNA進(jìn)行了研究。 材料和方法：實(shí)驗(yàn)組：選2005年山西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科臨床表現(xiàn)為激素抵抗型腎病綜合征的患者30例。其中：22例成人病例中，

2、經(jīng)腎臟活組織穿刺檢查，有10例IgAN(IgA腎病)，5例MsPGN(系膜增生性腎小球腎炎)，4例MPGN(膜增殖型腎小球腎炎)，3例MN(膜性腎病)。30例病例均排除了可能的繼發(fā)性腎病綜合征，作為實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組：選取45例志愿者，身體健康，無腎病綜合征者。 23例患者標(biāo)本及45例對(duì)照組標(biāo)本采用聚合酶鏈反應(yīng)序列特異性引物(PCR-SSP)方法，7例標(biāo)本采用聚合酶鏈反應(yīng)序列特異性探針(PCR-SSO)方法，檢測(cè)了30例激素抵抗型腎

3、病綜合征(SRNS)患者和45例正常健康者的HLA-A、B、DR基因型別，研究了SRNS的基因頻率與正常對(duì)照者的基因頻率的關(guān)系。 30例標(biāo)本中，分別比較了全部30例SRNS與正常對(duì)照者基因頻率的關(guān)系，22例成人SRNS與正常對(duì)照者基因頻率的關(guān)系、8例兒童SRNS與正常對(duì)照者基因頻率的關(guān)系，10例活檢為IgAN的SRNS與正常對(duì)照者基因頻率的關(guān)系。 結(jié)果：SRNS患者組中，用23種引物，共檢出12種HLA-A等位基因，基因

4、頻率范圍為1.67％～31.67％。其中HLA-A*02、*24、*11等位基因的頻率較高(31.67％、16.67％、15.00％)，HLA-A*01、*29、*30、*32等位基因的頻率較低(均為1.67％)。用47種引物，共檢出17種HLA-B等位基因，基因頻率范圍為1.67％～23.33％。其中HLA-B*15、*44等位基因的頻率較高(23.33％、20.00％)，HLA-B*07、*08、*37、*38、*53等位基因的頻率

5、較低(均為1.67％)。用23種引物，共檢出12種HLA-DRB1等位基因，基因頻率范圍為1.67％～21.67％。其中HLA-DRB1*04、*07、09等位基因的頻率較高(21.67％、16.67％、16.67％)，HLA-DRB1*01、*13等位基因的頻率較低(均為1.67％)。 對(duì)照組中，用23種引物，共檢出11種HLA-A等位基因，基因頻率范圍為1.11％～22.22％。其中HLA-A*02、*11、*03等位基因的

6、頻率較高(22.22％、15.56％、14.44％)，HLA-A*23、*26、*33等位基因的頻率較低(1.11％、2.22％、3.33％)。用47種引物，共檢出22種HLA-B等位基因，基因頻率范圍為1.11％～12.22％。其中HLA-B*40、*13、*15等位基因的頻率較高(12.22％、11.11％、11.11％)，HLA-B*18、*37、*38、*39、*41、*45、*48、*55、*57等位基因的頻率較低(均為1.1

7、1％)。用23種引物，共檢出11種HLA-DRB1等位基因，基因頻率范圍為3.33％～17.78％。其中HLA-DRB1*15、*04等位基因的頻率較高(17.78％、15.56％)，HLA-DRB1*14等位基因的頻率較低(3.33％)。 SRNS組HLA-B*15、B*44與正常對(duì)照相比有顯著性差異，其基因頻率均高于對(duì)照組：HLA-B*15(23.33％Vs11.11％，P=0.045)、HLA-B*44(20％Vs5.56

8、％，P=0.006)。HLA-B*15、HLA-B*44與SRNS呈正相關(guān)，是SRNS的易感基因。SRNS患者HLA-B*15、B*44基因頻率增高是我們研究首次發(fā)現(xiàn)的，國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。 成人SRNS組HLA-DRB1*07、DRB1*15、B*44與正常對(duì)照相比差異有顯著性，其中HLA-DRB1*07、B*44基因頻率均高于對(duì)照組，HLA-DRB1*15基因頻率低于對(duì)照組：HLA-DRB1*15(4.55％Vs17.78％，P

9、=0.03)、HLA-DRB1*07(22.73％Vs7.78％，P=0.015)、HLA-B*44(27.27％Vs5.56％，P=0.000)。HLA-DRB1*07、B*44與成人SRNS呈正相關(guān)，是成人SRNS的易感基因；HLA-DRB1*15與成人SRNS呈負(fù)相關(guān)，是成人SRNS的保護(hù)基因。成人SRNS患者HLA-DRB1*07、HLA-B*44基因頻率增高是我們研究首次發(fā)現(xiàn)的，國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。 兒童SRNS組HLA-

10、DRB1*10與正常對(duì)照相比差異有顯著性，其基因頻率高于對(duì)照組：HLA-DRB1*10(12.50％Vs0.00％，P=0.022)。HLA-DRB1*10與兒童SRNS呈正相關(guān)，是兒童SRNS的易感基因。 IgAN患者組HLA-B*15與正常對(duì)照相比有顯著性差異，其基因頻率高于對(duì)照組：HLA-B*15(35.00％Vs11.11％，P=0.014)。HLA-DRB1*15有較明顯的降低(5.00％Vs17.78％，P=0.30

11、1)，但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HLA-DRB1*04有較明顯的升高(30.00％Vs15.56％，P=0.195301)，也沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HLA-B*15與表現(xiàn)為SRNS的IgAN呈正相關(guān)，是IgAN的易感基因。表現(xiàn)為SRNS的IgAN患者HLA-B*15基因頻率增高是我們研究首次發(fā)現(xiàn)的，國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。 討論：由于HLA的分布與地區(qū)和種族有關(guān)，所以國(guó)內(nèi)外對(duì)HLA與激素抵抗型腎病綜合征(SRNS)的疾病相關(guān)性的研究結(jié)果并不一致。

12、 我們研究的未區(qū)分發(fā)病年齡的30例SRNS患者，只發(fā)現(xiàn)HLA-B*15、B*44基因頻率較對(duì)照明顯升高(P=0.045，OR=2.435；P=0.006，OR=4.250)，HLA-DRB1基因頻率沒有發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組的顯著性差異。HLA-B*15、B*44與SRNS的相關(guān)性未見報(bào)道。 22例成人發(fā)病的SRNS患者，HLA-DRB1*07、B*44基因頻率較對(duì)照組明顯升高(P=0.000，OR=6.375；P=0.015，OR

13、=3.487)，HLA-DRB1*15基因頻率較對(duì)照組明顯降低(P=0.035，OR=0.022)。英國(guó)、希臘成人SRNS患者中也發(fā)現(xiàn)HLA-DRB1*15基因頻率降低，但日本則報(bào)道成人SRNS患者HLA-DRB1*15基因頻率升高。HLA-DRB1*07、B*44與成人SRNS患者的關(guān)聯(lián)性未見報(bào)道，但是有些地區(qū)有報(bào)道兒童SRNS與HLA-DRB1*07的關(guān)系。對(duì)于國(guó)內(nèi)外報(bào)道較多的HLA-DRB1*03、DRB1*04、B*08，我們的

14、研究表明HLA-DRB1*04的基因頻率增加(25％Vs15.56％)，但沒有統(tǒng)計(jì)意義：HLA-DRB1*03、B*08的基因頻率與對(duì)照相比沒有明顯變化(4.55Vs4.44％、0.00％Vs2.22％)。 8例兒童發(fā)病的SRNS患者，HLA-DRB1*10基因頻率較對(duì)照組明顯升高(P=0.022，OR=31.207)，與國(guó)內(nèi)報(bào)道一致。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)的HLA-DRB1*03、DRB1*07、DRB1*04基因頻率，在我們的研究中沒

15、有發(fā)現(xiàn)關(guān)聯(lián)性。 研究認(rèn)為原發(fā)性腎病綜合征與HLA-DRB1基因頻率有關(guān)，但我們的研究顯示，HLA-DRB1基因頻率在30例沒有區(qū)分發(fā)病年齡的激素抵抗腎病綜合征(SRNS)患者組中沒有發(fā)現(xiàn)相關(guān)性，而22例成人發(fā)病的SRNS患者中發(fā)現(xiàn)HLA-DRB1*15基因頻率較對(duì)照明顯降低、HLA-DRB1*07基因頻率較對(duì)照明顯增高，8例兒童發(fā)病的SRNS患者組中發(fā)現(xiàn)HLA-DRB1*10基因頻率較對(duì)照明顯升高。HLA-DRB1*15基因頻率

16、較低，是成人SRNS的保護(hù)基因，HLA-DRB1*07基因頻率較高，是成人SRNS的易感基因；HLA-DRB1*10頻率較高，是兒童SRNS的易感基因。提示HLA與SRNS的相關(guān)性不僅與人種、國(guó)家和地區(qū)有關(guān)，還可能與發(fā)病年齡有關(guān)。如果增大樣本量，則有利于HLA單倍型與疾病相關(guān)性的研究以及發(fā)現(xiàn)與HLA緊密連鎖的基因，從而進(jìn)一步確定HLA-DRB1*15、10、07是易感基因或抵抗基因。 HLA多態(tài)性分布是在人類進(jìn)化中形成的，而其與