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文檔簡介
1、糞腸球菌(Enterococcus faecalis)為鏈球菌科,腸球菌屬的代表種,是健康人體的上呼吸道、口腔或腸道的常駐菌,也是重要的條件致病菌。近來的研究發(fā)現(xiàn),糞腸球菌的感染往往會導(dǎo)致根管治療的失敗。由于糞腸球菌極易侵入牙本質(zhì)小管,且具有超強的生存能力,僅依靠根管預(yù)備和充填無法將其完全清除,必須借助于有效的根管消毒藥物才能治療其引起的感染。而目前臨床常用的一些根管消毒藥物要么對其效果不佳,要么毒副作用過大,因此,尋找一種既安全又能有
2、效殺滅牙本質(zhì)小管內(nèi)的糞腸球菌的消毒藥物,對提高根管治療效果具有重要意義。
五倍子富含五倍子鞣質(zhì),具有良好的抗菌特性。有研究表明,其水提物對感染根管內(nèi)的厭氧菌具有廣譜抗菌作用,水煎劑對引起院內(nèi)感染的糞腸球菌耐藥菌株有理想的殺滅效果。另外,作為天然藥物,五倍子具有不易產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性和對人體毒副作用低的特點,提示其有可能成為安全有效的理想根管消毒藥物。
本研究通過觀察五倍子對浮游態(tài)、離體牙根管和單一生物膜中的糞腸球菌的殺滅
3、效果,對糞腸球菌膠原粘附以及對根管壁顯微硬度的影響,以探討其用于治療糞腸球菌根管感染的可能性。
實驗一:五倍子水提取物對糞腸球菌抑制作用的體外實驗
采用試管液體二倍稀釋法,測定五倍子水提取物對糞腸球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的最小抑菌濃度(MIC)和殺菌濃度(MBC),并同時與鞣酸標(biāo)準(zhǔn)品和氯己定進(jìn)行對比,觀察比較五倍子水提取物對其體外抑制作用。結(jié)果顯示,五倍子水提取物在體外對于糞腸球菌有良好的抑制作用,能在6.25mg/mL的濃度起
4、到殺菌的效果。
實驗二:五倍子水提取物對感染牛牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌殺滅效果的體外研究
采用牛牙本質(zhì)小管糞腸球菌感染模型檢測五倍子水提取物對牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌的殺滅效果,使用氯己定作為對照。實驗結(jié)果表明二者均能完全殺滅牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌,雖然五倍子需要的作用時間稍長,但是1d后兩者的作用沒有差異。
實驗三:五倍子水提取物對單一生物膜中糞腸球菌活性影響的體外研究
在玻片上形成24h糞腸球菌生物膜,
5、熒光探針染色后通過CLSM觀察五倍子處理對單一生物膜中糞腸球菌活性的影響,使用氯己定作為陽性對照。結(jié)果顯示,經(jīng)五倍子處理后,生物膜中活菌比例顯著下降,隨著處理時間的延長,死菌進(jìn)一步增多,處理30min后生物膜中絕大多數(shù)為死菌。且生物膜經(jīng)五倍子處理后較氯己定組菌體更為分散。
實驗四:五倍子水提取物抑制糞腸球菌粘附能力的體外研究
本實驗包括兩個部分。首先利用底部鋪有膠原蛋白的細(xì)胞培養(yǎng)板,觀察五倍子的處理對于糞腸球菌粘附膠
6、原的影響;然后利用掃描電鏡考察五倍子處理對于糞腸球菌粘附牙本質(zhì)的影響。結(jié)果顯示,五倍子預(yù)處理膠原蛋白和牙本質(zhì)大大降低了糞腸球菌對二者的粘附能力。
實驗五:五倍子水提取物對根管壁顯微硬度的影響的體外實驗
使用牛牙根管段制作顯微硬度測試件,五倍子水提取物處理不同的時間后測試根管壁的顯微硬度,使用EDTA作為對照。結(jié)果五倍子處理1d、7d后,顯微硬度均數(shù)稍有下降,但與處理前無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05),而陽性對照組處理10
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