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文檔簡介
1、目的:觀察蘆薈多糖對體外培養(yǎng)人表皮細胞增殖和細胞因子分泌的影響,探討其在創(chuàng)面愈合過程新生上皮重建中的作用。 方法: 1、體外培養(yǎng)表皮細胞隨機分為蘆薈多糖組(25,50,100,200,400mg/L)和對照組。通過MTT法、細胞計數(shù)法和細胞融合時間以及[<'3>H]-TdR滲入量觀察細胞增殖狀況,流式細胞技術(shù)檢測細胞周期,熒光標記法檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度,LDH漏出率反映細胞損傷程度,光鏡和電鏡觀察細胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)。
2、 2、ELISA和RIA法測定表皮細胞分泌生長因子(TGF-α、EGF和TGF-β<,1>)和炎癥因子(IL-1β、IL-6、IL-8和TNF)水平,Green法測定表皮細胞分泌NO水平。 結(jié)果: 1、倒置相差顯微鏡觀察到,各組表皮細胞形態(tài)基本相似,透射電鏡下觀察蘆薈多糖組細胞增殖活躍,核內(nèi)以常染色質(zhì)為主,對照組以異染色質(zhì)為主;與對照組比較,蘆薈多糖組細胞增殖達峰值的時間較對照組提前1~2 d,細胞倍增指數(shù)顯著上升,
3、細胞融合時間明顯縮短28~58 h,[<'3>H]-TdR滲入量顯著升高(P-<0.05),并呈劑量依賴性。 2、與對照組比較,蘆薈多糖作用后表皮細胞[Ca<'2+>]i水平略有升高(P<0.05),G0/G1期細胞比例下降,G2/M期和S期細胞比例明顯增高(P<0.05), LDH漏出率均有不同程度地下降(P<0.05)。 3、與對照組比較,蘆薈多糖作用后表皮細胞分泌TGF-α、EGF、tGF-β1和 IL-1β、IL
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