全面性癲癎伴熱性驚厥附加癥同胞患者GABA受體已知突變通道多態(tài)性分析.pdf

1、癲癎（epilepsyEP）是神經(jīng)系統(tǒng)常見的一組疾病，主要是由一組不同的病因所導(dǎo)致的腦部神經(jīng)元同步和異常放電，引起以意識障礙和（或）骨骼肌陣攣和（或）強直性抽搐為主要特征。目前全世界約有癲癎患者超過4000萬，我國約900萬。對癲癎的發(fā)病機制進行探討，不僅有利于明確癲癎的具體發(fā)作原因及過程，及時給予干預(yù)治療，而且對于糾正全社會對癲癎的錯誤觀念，社會的和諧和穩(wěn)定，也具有重要的意義。長期以來，許多的研究者對癲癎的發(fā)病機理及診斷治療的研究取得

2、了豐碩的成果。尤其近些年來，在神經(jīng)遞質(zhì)和離子通道方面的研究如火如荼，也面臨更多的機遇與挑戰(zhàn)。
　　全面性癲癎伴熱性驚厥附加癥（GeneralizedEpilepsyWithFebrileSeizuresPlusGEFS+）是特發(fā)性全身性癲癎（idiopathicgeneralizedepilepsyIGE）中常見的一組疾病，呈常染色體顯性遺傳，有顯著的遺傳特性,外顯率約為60％-89％，被認(rèn)為可能是兒童期最為常見的一種遺傳性癲癎綜

3、合征。目前發(fā)現(xiàn)的與GEFS+的發(fā)病有關(guān)研究成果最多，所發(fā)現(xiàn)的通道突變的種類也較多。其中γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutycAcidGABA)受體通道的突變的研究也有進展。目前發(fā)現(xiàn)的與GABA有關(guān)的突變位點包括R43Q、K289M、Q351XA322D,多為家系研究中發(fā)現(xiàn)，且陽性率很低。從理論上講，同胞患病具有較高的遺傳可能性。而家系中僅有同胞患病是一種特殊的類型。但目前未見到在同胞患者中進行GEFS+關(guān)于GABA受體通道突變的

4、報道。
　　本實驗選取了3組共6例GEFS+同胞患者，同時為了便于對比，選擇了6例散發(fā)的GEFS+患者，抽取所有實驗者的外周血，提取DNA,同時設(shè)計已知突變位點的相關(guān)外顯子引物，分別為GABRG2中的外顯子2，外顯子8，外顯子9，及GABRA1中的外顯子10.利用所提取的DNA進行PCR反應(yīng)以擴增相應(yīng)的外顯子序列。反應(yīng)完成后行瓊脂糖凝膠電泳以檢測所獲得的外顯子序列條帶位置是否與已知的外顯子序列應(yīng)處的位置一致。若一致，則認(rèn)為反應(yīng)成功

5、，將反應(yīng)產(chǎn)物送公司測序，結(jié)果反饋后利用軟件進行與已知正常序列的比對，以查找是否存在突變及多態(tài)性位點。得出相應(yīng)的結(jié)論。
　　實驗結(jié)果：
　　（1）所有PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后可見條帶所處位置與已知序列的大小一致，認(rèn)為反應(yīng)是成功的。
　?。?）將反應(yīng)產(chǎn)物送公司測序后反饋的序列結(jié)果與正常序列經(jīng)比對后均未發(fā)現(xiàn)突變及多態(tài)性位點的存在。
　　本實驗結(jié)論如下：
　　(1)在GEFS+同胞患者及散發(fā)患者中均未發(fā)現(xiàn)已