Dll4-Notch信號途徑對胃癌生物學(xué)行為的影響及機制研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文Dll4Notch信號途徑對胃癌生物學(xué)行為的影響及機制研究姓名：李國剛申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)(普外)指導(dǎo)教師：陳力20120529浙江大學(xué)博士學(xué)位論文摘要增殖，分化與凋亡等生物學(xué)行為。Dll4作為Notch信號途徑的五個配體之一，對血管生成發(fā)揮著決定性的調(diào)節(jié)作用。近年來的研究表明Notch信號途徑不僅調(diào)控血管生成，也對腫瘤的進展發(fā)揮著重要作用，因而被認為是一個潛在的治療靶點。有趣的是，Notch信號途徑在不同

2、的實體瘤中可能起著截然不同的生物學(xué)作用。在胰腺癌，結(jié)腸癌、乳腺癌等大多數(shù)實體瘤中表現(xiàn)為致癌作用，而在部分皮膚癌，肺癌及前列腺癌中表現(xiàn)為抑癌作用。與其他實體瘤相比，Notch信號途徑在胃癌惡性生物學(xué)行為中的作用及其機制的相關(guān)研究報道較少。在本實驗中，我們首先利用實時熒光定量PCR、w色st鋤blott她及免疫熒光技術(shù)研究Dll州otCh信號通路相關(guān)基因及蛋白在胃癌細胞系表達情況，并利用免疫組化方法檢測30例臨床胃癌標本中DIl4蛋白表達情

3、況及其分布，發(fā)現(xiàn)Dll4及Notchl胞內(nèi)段NIcD在5株胃癌細胞系中均有陽性表達，Dll4蛋白在胃癌組織中的表達陽性率明顯高于癌旁及正常胃粘膜組織；隨后，進一步在體外培養(yǎng)胃癌細胞系中研究了DIl州otch異常激活對胃癌增殖、侵襲、遷移及化療藥物敏感性等生物學(xué)行為的影響，并在荷瘤BALB／C雄性小鼠體內(nèi)研究了Dll4／Notch異常激活對胃癌生長的影響。另外，我們初步研究了丫分泌酶抑制劑D。6胛對體外培養(yǎng)的胃癌細胞增殖的影響。2實驗方法

4、21Dll4及其主要受體NotChl在胃癌細胞系中的表達：利用RealTiIncPCR、w，estemblotting與免疫熒光在mRNA與蛋白水平檢測Dll4及Notchl受體活性胞內(nèi)段NICD在胃癌細胞系中的表達水平。22Dll4在臨床胃癌標本中的表達及其分布：利用免疫組化方法檢測Dll4在30例臨床胃癌組織、癌旁及正常胃粘膜組織中的表達及分布。23構(gòu)建pEGFPC1Dll4過表達載體并建立過表達D114穩(wěn)轉(zhuǎn)胃癌細胞系：為研究Dll