EPCR基因6936A-G多態(tài)性和深靜脈血栓相關(guān)性研究.pdf

1、深靜脈血栓形成(Deep venous thrombosis，DVT)是一種常見病和多發(fā)病，隨著生活水平提高和老齡化社會的到來，血栓性疾病呈上升趨勢。在西方國家中DVT年發(fā)病率占總?cè)丝诘那Х种?，在美國DVT的年發(fā)病率超過25萬人次，我國對DVT的發(fā)病率還沒有進行完整的流行病學(xué)調(diào)查，但近年來發(fā)病率有逐漸上升趨勢。 目前，DVT已被認為是一種多基因性疾病。其中內(nèi)皮細胞蛋白C受體(endothelial cell protein C

2、 receptor，EPCR)是近年來的一個研究熱點。EPCR主要表達在大血管內(nèi)皮細胞表面，通過凝血酶—血栓調(diào)節(jié)素(thrombomodulin，TM)復(fù)合物增進蛋白C(protein C，PC)／活化蛋白C(activated protein C，APC)活性，大大提高PC的活化率。目前為止已發(fā)現(xiàn)EPCR存在多種基因突變或多態(tài)性，從而改變了EPCR的表達與功能。H3單倍體即為第6936位核苷酸A/G是研究較多的一個單核苷酸多態(tài)性，在國

3、內(nèi)尚未見報道。本課題擬通過分析DVT患者EPCR基因6936A/G多態(tài)性和血漿可溶性EPCR(soluble EPCR，sEPCR)水平的相關(guān)性，探討EPCR基因在DVT中可能的作用。 研究對象:為本院就診的65例DVT患者和71例性別、年齡與之匹配的健康體檢者。取外周血，離心后用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量測定血漿sEPCR水平；提取血細胞中的DNA，用合成的特異性引物(上游引物5'GCTTCAGTCATTGGTA

4、AAC 3'，下游引物5'TCTGGCTTCACAGTGAGCTG 3’)進行聚合酶鏈反應(yīng)，得到目的片段EPCR基因315bp。2％凝膠電泳分離擴增產(chǎn)物后，回收純化目的片段，送至生物公司直接測序，分析EPCR基因第6936位點的多態(tài)性。 結(jié)果顯示：在正常對照組中，AG基因型組血漿sEPCR水平明顯高于AA基因型組(0.97±0.32pg/ml vs．0.61±0.24pg/ml，P＜0.01)，在DVT組亦得到類似的結(jié)果(0.8

5、7±0.21pg/ml vs．0.50±0.18 pg/ml，P＜0.01)。DVT組的血漿sEPCR水平明顯高于正常對照組(0.68±0.32 pg/ml vs．0.54±0.22 pg/na，P＜0.05)。DVT組AG基因型頻率明顯高于正常對照組(P＜0.05)，從基因型頻率明顯低于正常對照組，GG基因型頻率相當。AG基因型與從基因型比較患DVT的危險性O(shè)R=2.75，95％可信區(qū)間為1.04-7.30(P＜0.05)。