TLR2配體肽聚糖對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和分化為脂肪細(xì)胞及成骨細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:研究Toll樣受體2(TLR2)的配體肽聚糖(PGN)在體外對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)增殖和分化為脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞的影響。
　　 方法:Ficoll法分離培養(yǎng)健康供體的BM-MSC；用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)BM-MSC中CD34、CD45、HIA-DR、CD44和CD71的表達(dá)；MTT法檢測(cè)PGN對(duì)BM-MSC增殖的影響，并繪制生長(zhǎng)曲線；流式細(xì)胞儀檢測(cè)PGN對(duì)BM-MSC細(xì)胞周期的影響；成脂、成骨誘導(dǎo)條件下，

2、觀察PGN對(duì)BM-MSC定向分化的影響。
　　 結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示：BM-MSC高表達(dá)CD44、CD71，而CD45、CD34HLA-DR呈陰性表達(dá)。BM-MSC與PGN共培養(yǎng)后，BM-MSCs的增殖指數(shù)明顯增加，各濃度組PGN的組內(nèi)比較，以10ug/ml最明顯，10ug/ml、20ug/ml相比較無明顯差異；與對(duì)照組比較，PGN干預(yù)組G0/G1期比例降低，S期和G2/M期細(xì)胞比例增加，結(jié)果與MTT相一致；成脂細(xì)胞誘導(dǎo)條件

3、下的BM-MSC，第14、21天細(xì)胞成脂率計(jì)數(shù)結(jié)果分別為65.5％±5.3％、85.2％±3.4％。而實(shí)驗(yàn)組為32.2％±4.8％、42.3％±3.4％。成骨誘導(dǎo)條件下的BM-MSC，誘導(dǎo)第7日即有堿性磷酸酶(ALP)表達(dá)，細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)于誘導(dǎo)第10天出現(xiàn)，于誘導(dǎo)第14、21日行茜素紅染色顯示，分別70.5％±3.5％、87.5％±3.5％，形成小片狀礦化結(jié)節(jié)；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組礦化結(jié)節(jié)出現(xiàn)時(shí)間較晚，于誘導(dǎo)于誘導(dǎo)第14、21日行茜素紅染