白三烯受體拮抗劑對致敏大鼠血管內(nèi)皮生長因子及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究白三烯受體拮抗劑（孟魯司特）對支氣管哮喘（簡稱哮喘）氣道炎癥和氣道重塑的影響，揭示白三烯受體拮抗劑對血管內(nèi)皮生長因子（Vascular endothelial growth factor簡稱VEGF）及其受體的調(diào)控作用。
　　 方法：將24只清潔雄性SD大鼠按隨機數(shù)字表法分為健康對照組、哮喘模型組、白三烯受體拮抗劑干預(yù)組，每組8只。對照組采用生理鹽水致敏和激發(fā)，哮喘組采用卵蛋白致敏和激發(fā)，干預(yù)組在激發(fā)前給予孟魯司特灌胃

2、。采用動物肺功能儀檢測各組大鼠氣道呼氣阻力；收集肺泡灌洗液并進(jìn)行細(xì)胞分類計數(shù)；肺組織行病理染色；采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對各組大鼠血清中VEGF和（白三烯D4）LTD4進(jìn)行定量分析；用免疫組織化學(xué)方法檢測VEGF、血管內(nèi)皮生長因子受體1（VEGFR1）及血管內(nèi)皮生長因子受體2（VEGFR2）在大鼠肺組織內(nèi)的表達(dá)水平。采用圖像分析軟件測定肺組織切片中的血管計數(shù)、血管平滑肌厚度；采用BCG法檢測血清和肺泡灌洗液中的白蛋白，計算血管滲

3、透指數(shù)。
　　 結(jié)果：（1）肺泡灌洗液（BALF）中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)：對照組分別為（42±7）×105/L、（3.28±0.37）×105/L，哮喘組分別為（128±6）×105/L、（32.55±2.09）×105/L，干預(yù)組分別為（78±5）×105/L、（8.63±0.18）×105/L。對照組和干預(yù)組分別與哮喘組比較，BALF中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；（2）肺功能檢測顯示：3組大

4、鼠基礎(chǔ)氣道阻力相比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），經(jīng)靜脈注射乙酰膽堿后哮喘組大鼠氣道平均呼氣阻力明顯升高（P<0.05）；（3）對照組血清中VEGF和LTD4的水平分別為17±5ng/L、6.1±0.7 ng/L；哮喘組分別為31±6ng/L、10.7±3.5ng/L；干預(yù)組分別為15±4ng/L、9.8±1.6ng/L，對照組和干預(yù)組分別與哮喘組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（F分別為63.78，39.56均P<0.01）；（4）免疫組織化學(xué)結(jié)果顯

5、示：哮喘組VEGF及受體在氣道上皮、氣道平滑肌、血管內(nèi)皮、肺泡上皮均大量表達(dá)，而對照組和干預(yù)組有較少表達(dá)。（5）圖像分析顯示：對照組、哮喘組、干預(yù)組的血管計數(shù)分別為14±2、22±2、16±4。與對照組比較，哮喘組血管計數(shù)增多，經(jīng)白三烯受體拮抗劑干預(yù)后，血管計數(shù)減少（F為34.67，P<0.01）（6）直線相關(guān)分析顯示，血管計數(shù)與血清中VEGF的水平正相關(guān)（r=0.705，P<0.05）；對照組大鼠，肺組織中VEGF與VEGFR1蛋白的

6、表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.655，P<0.05）；而在哮喘大鼠中，肺組織中VEGF與VEGFR2蛋白的表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.731，P<0.05）；與對照組相比，哮喘組VEGFR1與VEGFR2的比率上升。（7）血管滲透指數(shù)測定顯示：對照組、哮喘組及干預(yù)組分別為0.04±0.02、0.16±0.03、0.06±0.02，對照組與哮喘組、哮喘組與干預(yù)組分別比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（F為59.86，P<0.01）。
　　 結(jié)論