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文檔簡介
1、第一部分
目的:使用雙色示蹤劑在同一離體牛眼中標(biāo)記不同眼壓下的房水外流通路,觀察與眼壓急性升高相關(guān)的形態(tài)學(xué)與房水動(dòng)力學(xué)變化并探討當(dāng)眼壓恢復(fù)時(shí)這些變化的可逆性及其可能機(jī)制。
方法:實(shí)驗(yàn)組中共12只離體牛眼首先在30mmHg灌注壓下用5.5M葡萄糖磷酸緩沖液(GPBS)灌注,達(dá)到穩(wěn)定的房水流暢率后,用紅色熒光微粉球(0.5μm,0.002%v/v)2ml灌注標(biāo)記房水外流通路;用GPBS7ml置換前房紅色熒光微粉球后,將灌
2、注壓降至7mmHg,繼續(xù)灌注綠色熒光微粉球2m1(0.5μm,0.002%V/V)。灌注完成后置換綠色熒光微粉球,并用固定液灌注固定。在兩組對(duì)照組中,每組各6只離體牛眼,以相同方法在30mmHg或7mmHg下持續(xù)灌注。在各組的灌注過程中,均持續(xù)記錄房水流暢率(C值,outflow facility)。固定后的牛眼所有四個(gè)象限均做平行于角鞏膜的組織切片,用共聚焦顯微鏡檢查,沿房水叢內(nèi)壁拍照并測量有效濾過長度百分比(The percenta
3、ge of effective filtration length,PEFL)。該樣本進(jìn)一步處理后,用光學(xué)顯微鏡觀察,并計(jì)算伴有嵌塞(Hemiation)的集合管開口數(shù)目及房水叢內(nèi)壁與鄰管組織(juxtacanalicular connective tissue,JCT)分離長度的百分比(The percentage of the separation length,PSL)。
結(jié)果:在實(shí)驗(yàn)組(30-7mmHg)中,7mmHg
4、時(shí)的房水流暢率(4.81±1.33μl/min/mmHg)顯著大于30mmHg時(shí)的房水流暢率(0.99±0.15μl/min/mmHg,p=0.002),并與對(duì)照組(7-7mmHg)的房水流暢率(5.08±0.84μl/min/mmHg,p=0.674)比較無顯著差異。與此相應(yīng)的是,隨著眼壓的降低,有效濾過長度百分比增加(57.89±8.45%vs12.86±5.89%,p<0.01),房水叢塌陷恢復(fù),嵌塞的集合管開口數(shù)目(67.40±
5、8.90%)較對(duì)照組(30-30mmHg)(97.48±3.01%,p=0.020)減少及房水叢內(nèi)壁與鄰管組織分離長度百分比(38.32±3.57%)較對(duì)照組(30-30mmHg)增加(17.24±1.32,p=0.009)。
結(jié)論:在離體牛眼中,當(dāng)眼壓急性變化時(shí),房水外流通路的形態(tài)學(xué)變化導(dǎo)致了房水外流有效濾過區(qū)域的可逆性改變,藉此影響了房水外流阻力的大小。
第二部分
目的:研究離體人眼中與眼壓急性升高相關(guān)
6、的房水外流通路的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化及其與房水外流阻力間的關(guān)系;探討當(dāng)眼壓恢復(fù)時(shí)這些結(jié)構(gòu)變化的可逆性及其可能機(jī)制。
方法:實(shí)驗(yàn)組中共4只離體人眼首先在45mmHg灌注壓下用5.5M葡萄糖磷酸緩沖液(GPBS)灌注,達(dá)到穩(wěn)定的房水流暢率后持續(xù)灌注30分鐘,然后將灌注壓降至7mmHg,以GPBS灌注30分鐘后,再灌注綠色熒光微粉球150μl(0.02μm,0.002%v/v)。灌注完成后置換前房中綠色熒光微粉球,并用固定液灌注固定。在兩組
7、對(duì)照組中,每組各三只離體人眼,以相同方法在45mmHg或7mmHg下持續(xù)灌注。在各組的灌注過程中,均持續(xù)記錄房水流暢率。固定后的人眼球首先在低倍熒光照相機(jī)下拍攝眼球全周熒光照片,再將所有四個(gè)象限均做平行于角鞏膜的組織切片,用共聚焦顯微鏡檢查,沿Schlemm氏管內(nèi)壁照相并測量有效濾過長度百分比(PEFL)。該樣本進(jìn)一步處理后,用光學(xué)顯微鏡拍照,并計(jì)算伴有嵌塞(Hemiation)的集合管開口數(shù)目及Schlemm氏管平均寬度。
8、結(jié)果:在實(shí)驗(yàn)組(45-7mmHg)中,7mmHg時(shí)的房水流暢率(0.253μl/min/mmHg)顯著大于45mmHg時(shí)的房水流暢率(0.085μl/min/mmHg,p=0.029),并與對(duì)照組(7-7mmHg)的房水流暢率(0.289μl/min/mmHg,p=0.480)無顯著差異。與此相應(yīng)的是,實(shí)驗(yàn)組隨著眼壓的恢復(fù),高眼壓下呈現(xiàn)的節(jié)段性的房水外流模式變得相對(duì)彌散,平均有效濾過長度百分比(36.98%)較45-45mmHg組(19
9、.71%,p=0.034)增加并接近7-7mmHg水平(40.16%,p=0.480),同時(shí)伴Schlemm氏管塌陷恢復(fù),嵌塞的集合管開口數(shù)目的減少。
結(jié)論:在正常離體人眼中存在與牛眼及POAG眼球類似的節(jié)段性房水引流模式。急性眼壓升高時(shí),“Schlemm氏管內(nèi)壁區(qū)域”遠(yuǎn)端的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化(如Schlemm氏管塌陷,集合管嵌塞)可能通過減少有效濾過長度而影響外流模式,并最終增加房水的外流阻力。當(dāng)眼壓恢復(fù)時(shí),這些房水外流通路形態(tài)結(jié)
10、構(gòu)及房水動(dòng)力學(xué)變化是可逆的。
第三部分
目的:本研究目的是觀察原發(fā)性開角型青光眼(Primary Open Angle Glaucoma,POAG)患者在體眼中Schlemm氏管血液回流狀態(tài)并分析熒光素標(biāo)記的房水流向,藉此探索POAG患者房水外流通路中可能的阻力產(chǎn)生部位。
方法:本研究對(duì)象為2004年至2007年間于Pretoria大學(xué)醫(yī)學(xué)中心接受Schlemm氏管成形術(shù)的POAG患者19例(共24眼)?;?/p>
11、者在術(shù)前前房穿刺后接受了加壓前房角鏡檢查以觀察Schlemm氏管血液回流狀態(tài);術(shù)中當(dāng)Schlemm氏管暴露后,插入可彎曲微導(dǎo)管(iTrack 250A,iScience Interventional)以擴(kuò)張Schlemm氏管全長。然后經(jīng)導(dǎo)管每隔一象限注入熒光素以觀察熒光素標(biāo)記的房水外流模式,并計(jì)算每眼中伴熒光素著染的象限數(shù)。
結(jié)果:在24眼中共觀察到三種Schlemm氏管血液回流方式,環(huán)狀回流(Good reflux)9例,其
12、伴熒光素回流的平均象限數(shù)為3.67±0.50;節(jié)段性回流(Patchy reflux)6例,其伴熒光素回流的平均象限數(shù)為2。67±1.21及無回流(Noreflux)9例,其伴熒光素回流的平均象限數(shù)為0.89±0.93,62.5%的眼球未查及環(huán)狀連續(xù)的血液回流。24只術(shù)眼中平均每眼有熒光素著染的象限數(shù)為2.37±0.44(個(gè))。本實(shí)驗(yàn)中24眼前房穿刺后Schlemm氏管血液回流方式和Schlemm氏管擴(kuò)張后伴熒光素外流的平均象限數(shù)正相關(guān)
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