過氧化物酶增殖物激活受體γ激動劑治療垂體腺瘤的實驗研究.pdf

1、第一部分過氧化物酶體增殖物激活受體γ在垂體腺瘤中的分布情況和表達(dá)水平的實驗研究 目的研究過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferatoractivatedreceptorγ，PPARγ)在人垂體腺瘤組織及鼠垂體瘤細(xì)胞株中的分布情況和表達(dá)水平。 方法正常垂體組織共5例，來自于尸檢，38例垂體腺瘤組織取自經(jīng)蝶或開顱手術(shù)。免疫組織化學(xué)染色檢測PPARγ在正常垂體組織及垂體腺瘤中的分布情況。Wester

2、nBlot方法分析PPARγ在垂體腺瘤中的表達(dá)水平，比較正常垂體與垂體腺瘤、侵襲性與非侵襲性垂體腺瘤之間PPARγ表達(dá)水平的差異。RT-PCR及WesternBlot方法檢測PPARγ在GH3、MMQ、ATt20等垂體瘤細(xì)胞株中的表達(dá)情況。 結(jié)論P(yáng)PARγ在垂體腺瘤中表達(dá)明顯高于正常垂體組織，在侵襲性垂體腺瘤中表達(dá)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組織。PPARγ在鼠源的GH3、MMQ、ATt20等垂體瘤細(xì)胞株中均有較高的表達(dá)，為我們進(jìn)行

3、PPARγ激動劑治療垂體腺瘤的實驗研究提供可行的途徑。 第二部分氧化物酶增殖物激活受體γ激動劑對垂體腺瘤細(xì)胞生長的影響及機(jī)理的實驗研究 目的研究過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferatoractivatedreceptorγ，PPARγ)激動劑對體外培養(yǎng)的垂體腺瘤細(xì)胞生長的影響及其機(jī)制。 方法以四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法及PI染色分析經(jīng)PPARγ激動劑羅格列酮(Rosiglita

4、zone)和15PGJ2作用后GH3、MMQ、ATt20等垂體腺瘤細(xì)胞的增殖情況；AnnexinV、PI雙標(biāo)法檢測經(jīng)PPARγ激動劑作用后GH3、MMQ、ATt20等垂體腺瘤細(xì)胞的凋亡情況，并通過透射電鏡予以形態(tài)學(xué)方面的驗證；用real-timePCR方法檢測PPARγ激動劑15PGJ2作用前后GH3細(xì)胞中bad、bax、bcl2、caspase3、caspase8、caspase9等凋亡因子mRNA水平的變化。 結(jié)論P(yáng)PARγ

5、激動劑可阻滯體外培養(yǎng)的垂體瘤細(xì)胞增殖周期并誘導(dǎo)其凋亡；兩種PPARγ激動劑與垂體腺瘤細(xì)胞的生長抑制均存在著明確的時間劑量反應(yīng)關(guān)系；PPARγ激動劑可能是在bcl2家族因子和caspase家族因子的參與下誘導(dǎo)垂體腺瘤細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。 第三部分氧化物酶增殖物激活受體γ激動劑對垂體腺瘤細(xì)胞生長及激素分泌抑制作用的體內(nèi)實驗研究 目的研究過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferatoractivatedre

6、ceptorγ，PPARγ)激動劑在體內(nèi)實驗中對垂體腺瘤細(xì)胞生長及激素分泌的影響 方法用皮下種植的方法分別構(gòu)建GH3、MMQ、ATt20垂體腺瘤細(xì)胞的載瘤裸小鼠模型各10只，種植腫瘤3周后把每組10只小鼠再隨機(jī)分成藥物治療組及對照組，接受PPARγ激動劑rosiglitazone治療6周，監(jiān)測腫瘤大小及血中垂體激素水平的變化。 結(jié)論P(yáng)PARγ激動劑可以抑制種植瘤小鼠體內(nèi)的垂體腺瘤細(xì)胞的生長，且可以降低其相應(yīng)的激素分泌水平