胸腔積液中表面活性物質(zhì)的檢測分析.pdf

1、目的： 肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A是原發(fā)性肺腺癌非常有價(jià)值的免疫組織化學(xué)標(biāo)志，本研究旨在檢測不同病因引起的胸腔積液患者其胸水中肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A、D(SP-A、SP-D)，同時(shí)檢測胸水中磷脂，探討聯(lián)合監(jiān)測SP-A、SP-D和磷脂對(duì)胸腔積液，尤其是結(jié)核性胸腔積液和原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液的鑒別診斷價(jià)值。胸腔鏡下對(duì)胸膜粘連肥厚進(jìn)行評(píng)估，探討不同原因胸腔積液患者胸水中肺表面活性物質(zhì)含量是否與胸膜粘連肥厚有關(guān)。 方法：

2、 1．采用微量BCA法測定胸水中總蛋白，Western-blotting檢測胸水中肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A和D。其中SP-A和SP-D光密度值采用Alphalmager 2000軟件分析以曲線下面積表示。 2．硫酸-高氯酸消化-孔雀綠顯色法檢測胸水中總磷脂含量。 3．胸腔鏡下胸膜粘連肥厚評(píng)估參照Lee YC的方法：1分：壁層和臟層胸膜沒有粘連；2分：壁層和臟層胸膜間罕見粘連；3分：壁層和臟層胸膜可見散在粘連；4分：壁

3、層和臟層胸膜間有很多粘連，但兩層胸膜無融合；5分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，但兩層胸膜融合少于單側(cè)胸腔的5％；6分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，兩層胸膜間融合占單側(cè)胸腔5％～25％；7分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，且兩層胸膜間融合占單側(cè)胸腔25％～50％；8分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，兩層胸膜間融合大于單側(cè)胸腔50％。 結(jié)果： 1．各組胸水中總蛋白含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中總蛋白為32.2±12.31

4、ug/uL，結(jié)核性胸膜炎患者胸水中蛋白含量為29.4±8.97ug/uL，兩者總蛋白差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 ②其它：6例原發(fā)性肺鱗癌總蛋白含量為33.5±10.27ug/uL；2例小細(xì)胞肺癌分別是29.6ug/uL和34.8ug/uL；2例胸膜間皮瘤總蛋白分別為35.3ug/uL和32.8ug/uL；4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移及肺炎旁胸腔積液的蛋白平均為30.5±3.37ug/uL和29.5±4.36ug/uL，由于樣本數(shù)量

5、太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 2．胸水中SP-A、SP-D含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中SP-A光密度值高于結(jié)核性胸膜炎患者(265.1±141.1 vs 180.0±64.1，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②原發(fā)性肺腺癌患者胸水中SP-D光密度值高于結(jié)核性胸膜炎患者(299.9±140.6 vs 206.8±86.8，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ③36例原發(fā)性肺腺癌患者中有23例胸水中SP-A>

6、250，有16例SP-D>250，而SP-A>250和(或)SP-D>250有29例。28例結(jié)核性胸膜炎患者胸水中SP-A、SP-D均未超過250。 ④其它：本實(shí)驗(yàn)還測定了4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移患者，蛋白條帶較結(jié)核性胸膜炎患者要濃，6例鱗癌中有2例顯出條帶4例無顯影，2例胸膜間皮瘤及2例小細(xì)胞肺癌均未顯影，4例肺炎患者蛋白條帶濃淡不一，由于樣本數(shù)量太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 3．胸水中總磷脂含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中

7、磷脂磷含量高于結(jié)核性胸膜炎患者(0.9156±0.4380mmol/L vs 0.9148±0.2870mmol/L，P>0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②其它：6例原發(fā)性肺鱗癌總磷脂磷含量為0.8257±0.2005mmol/L；2例小細(xì)胞肺癌分別是0.8756mmol/L和0.7120mmol/L；2例胸膜間皮瘤總磷脂分別為0.7153mmol/L和0.7589mmol/L；4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移及肺炎旁胸腔積液的磷脂平均為0.

8、7257±0.1235mmol/L和0.8356±0.1587mmol/L，由于樣本數(shù)量太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 4．肺表面活性物質(zhì)與胸膜肥厚關(guān)系①胸腔鏡下觀察到結(jié)核性胸膜炎患者，胸膜粘連更多見。結(jié)核性胸膜炎患者胸膜粘連評(píng)分高于原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液患者(4.3±1.3 vs 2.2±1.0，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②結(jié)核性胸膜炎患者依據(jù)胸水中SP-A和SP-D表達(dá)分別分為三組：A1組：250>SP-A>200

9、，A2組：200>SP-A>100，A3組：SP-A<100；D1組：250>SP-D>200，D2組：200>SP-D>100，D3組：SP-D<100。 結(jié)核性胸膜炎患者組間比較結(jié)果：A1組與A2組比較(3.3±0.5 vs 3.8±0.8，P>0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A1組與A3組比較(3.3±0.5 vs 5.3±0.3，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A2組與A3組比較(3.8±0.8 vs 5.3±0.3，P

10、<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D1組與D2組比較(3.0±0.4 vs 3.6±1.1，P>0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D1組與D3組比較(3.0±0.4 vs 5.0±0.7,P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D2組與D3組比較(3.6±1.1 vs 5.0±0.7，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ③原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液及其它惡性胸腔積液患者，在胸腔鏡下很少觀察到胸膜粘連。 結(jié)論： 1．肺表面活性物質(zhì)

11、相關(guān)蛋白A是原發(fā)性肺腺癌的免疫組織化學(xué)標(biāo)志，對(duì)原發(fā)性肺腺癌的鑒別診斷有價(jià)值，聯(lián)合監(jiān)測肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D對(duì)原發(fā)性肺腺癌和結(jié)核性胸腔積液的鑒別診斷更有意義。 2．原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液與結(jié)核性胸膜炎患者胸水中肺表面活性物質(zhì)一磷脂比較，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3．目前關(guān)于胸膜粘連的機(jī)制尚不清楚，有報(bào)道胸膜腔內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)，腫瘤壞死因子α(T