天維菌素類似物的分離鑒定及殺蟲活性研究.pdf

1、天維菌素(Tenvermectin)是從基因工程菌Streptomyces avermitilis MHJ1011發(fā)酵液中分離得到的新一類16元大環(huán)內(nèi)酯類化合物。活性測試表明，天維菌素與阿維菌素、伊維菌素和米爾貝霉素相比，對蚜蟲、螨、鱗翅目類害蟲和其它危害作物的害蟲以及家畜寄生蟲都具有更好的防治效果。鑒于該類化合物具有廣譜、高效、低毒等特點(diǎn)，被認(rèn)為是一種非常有前景的新一代農(nóng)藥和獸藥。本論文的研究內(nèi)容包括:天維菌素產(chǎn)生菌次級代謝產(chǎn)物的分離

2、鑒定;天維菌素的微生物轉(zhuǎn)化;所得化合物殺蟲殺螨活性測定。
　　1、天維菌素產(chǎn)生菌次級代謝產(chǎn)物的分離鑒定。將基因工程菌Streptomyces avermitilis MHJ1011的發(fā)酵液(30L)用工業(yè)乙醇浸泡后，經(jīng)過濾、萃取、濃縮等前處理得到270g油性浸膏。油性浸膏經(jīng)硅膠柱層析(100-200目)和高效液相色譜法(C18柱、C3柱)等進(jìn)行分離純化，得到了3個(gè)代謝產(chǎn)物，利用核磁共振、高分辨質(zhì)譜、紅外光譜和紫外光譜等波譜分析方法

3、對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，結(jié)果表明這3個(gè)化合物均為新的天維菌素類似物，將其分別命名為天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E。
　　2、天維菌素的微生物轉(zhuǎn)化。將天維菌素A和天維菌素B作為底物，利用8株微生物菌株對其進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。經(jīng)薄層鑒定和高效液相色譜檢測分析，發(fā)現(xiàn)了2株對天維菌素具有轉(zhuǎn)化能力的菌株，其中紅色糖多孢菌Saccharopolyspora erythraea ATCC11635的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象最為明顯，因此選取該菌株對天維菌素A和B

4、進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。轉(zhuǎn)化后的發(fā)酵液經(jīng)硅膠柱層析(100-200目)、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)和高效液相色譜法(C18柱)等分離純化后得到兩個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。利用核磁共振、高分辨質(zhì)譜、紅外光譜和紫外光譜等波譜分析方法對轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明這兩個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物均為新化合物，分別命名為4"-O-glucosyl tenvernectin A和4"-O-glucosyl tenvermectin B。
　　3、化合物殺蟲殺

5、螨活性測定。以松材線蟲和朱砂葉螨為供試生物，測定了天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E的生物活性。天維菌素C和天維菌素D對松材線蟲24h的致死中濃度LC50分別為3.8156，4.1542mg/L，而天維菌素E對松材線蟲幾乎無生物活性;天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E對朱砂葉螨24h的致死中濃度LC50分別為0.0110，0.0105和0.0837mg/L。以松材線蟲、小菜蛾、竹螟和朱砂葉螨為供試生物，測定了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物4"-O-gluco

6、syl tenvermectins A和B的生物活性。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物4"-O-glucosyl tenvermectins A和B對松材線蟲24h的致死中濃度LC50分別為6.7984，5.7980mg/L;對小菜蛾48h的致死中濃度LC50分別為0.0534×103，0.0349×103mg/L;對竹螟48h的致死中濃度LC50分別為7.2568，6.1104mg/L;對朱砂葉螨24h的致死中濃度LC50分別為0.0156，0.0113mg