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1、目的:前言腦缺血再灌注損傷時(shí)神經(jīng)細(xì)胞死亡除壞死外,還存在另一種形式--細(xì)胞凋亡,且在缺血再灌注損傷中起著重要的作用.該研究采用大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型,經(jīng)側(cè)腦室注射質(zhì)粒pLXSN介導(dǎo)人bcl-2 cDNA后,觀察腦梗死體積、bcl-2及ICAM-1表達(dá)的同時(shí),證實(shí)bcl-2的神經(jīng)保護(hù)作用,探討bcl-2與ICAM-1之間的關(guān)系.材料與方法健康Wistar大鼠135只,體重250-300g,按隨機(jī)排列表隨機(jī)分為三組:生理鹽水組、空質(zhì)粒
2、組和bcl-2組,每組45只,每組在缺血2小時(shí)再灌注3、6、24、48、72小時(shí)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)又隨機(jī)分為5個(gè)亞組,每亞組9只.采用改良線栓法制備右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型,然后立即將大鼠固定在腦立體定位儀上,應(yīng)用立體定向技術(shù)向側(cè)腦室內(nèi)分別注射生理鹽水、質(zhì)粒pLXSN及pLXSN-bcl-2,MCAO制備成功的大鼠于缺血后2小時(shí)進(jìn)行再灌注.每亞組各取5只大鼠,分別于相應(yīng)的缺血再灌注時(shí)間點(diǎn)(3h、6h、24h、48h、72h)直接斷頭取
3、腦,采用TTC染色,應(yīng)用顯微圖象分析系統(tǒng)采集并分析腦梗死面積,按梯形法計(jì)算腦梗死體積.每亞組各取4只大鼠分別于相應(yīng)的缺血再灌注后3、6、24、48、72h灌注取腦,常規(guī)固定,石蠟包埋,制成石蠟切片后,采用免疫組織化學(xué)方法分別進(jìn)行bcl-2和ICAM-1免疫組化染色,應(yīng)用顯微圖象分析系統(tǒng)采集并分析圖象,觀察bcl-2及ICAM-1的表達(dá).各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間差異分析方法采用t檢驗(yàn),p<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.結(jié)論經(jīng)側(cè)腦室注射
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