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1、目的:通過(guò)戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)誘導(dǎo)大鼠點(diǎn)燃模型,觀(guān)察激光氧液(laser oxygenate fluid,LOF)對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶、海馬內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞凋亡及海馬內(nèi)Glu和GABA含量動(dòng)態(tài)變化的影響,來(lái)探討激光氧液治療癲癇的機(jī)制,并為癲癇的臨床治療開(kāi)辟新的思路。
方法:選21 d日齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠300只隨機(jī)分為模型糖水組(PTz+GS組)、模型激光氧液組(PTZ+LOF
2、組)、鹽水糖水組(NS+GS組)、鹽水激光氧液組(NS+LOF組)和空白組(Sham組)五個(gè)組,每組60只。模型兩組采用戊四氮腹腔注射制作慢性癲癇模型,鹽水兩組給予等體積生理鹽水,模型制作成功后分別給予激光氧液(LOF)及糖水(GS)尾靜脈注射,空白對(duì)照組不予任何處理;選擇處理后當(dāng)天(0天)、3天、7天、10天和14天時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀(guān)察,確保每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠,以Y-型電迷宮評(píng)價(jià)大鼠的認(rèn)知功能,視頻監(jiān)測(cè)點(diǎn)燃及治療過(guò)程中各組不同時(shí)間點(diǎn)大鼠的發(fā)
3、作情況,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法評(píng)價(jià)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的表達(dá)及采用高效液相方法檢測(cè)海馬組織G1u和GABA含量。
結(jié)果:1、行為學(xué)變化:PTZ+GS組、PTZ+LOF組慢性點(diǎn)燃后大鼠學(xué)會(huì)達(dá)標(biāo)次數(shù)明顯增多(P<0.05),LOF治療后,PTZ+LOF組7 d~14 d各時(shí)間點(diǎn)較相對(duì)應(yīng)的PTZ+GS組大鼠學(xué)會(huì)達(dá)標(biāo)次數(shù)明顯減少(P<0.05),尤以14 d明顯。PTZ+LOF組大鼠在治療后7 d~14 d驚厥發(fā)生率顯著下降,在第14 d時(shí)
4、比治療前下降到50%,同PTZ+GS組比較在治療7 d~14 d時(shí)兩者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、2.1 Bax(CA1區(qū))陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)結(jié)果:PTZ+GS組、PTZ+LOF組點(diǎn)燃后大鼠海馬內(nèi)Bax陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯高于NS+GS組、NS+LOF組、Sham組(P<0.05),LOF治療后,PTZ+LOF組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較PTZ+GS組明顯減少(P<0.05),減少趨勢(shì)尤以10d明顯。2.2 Bcl-2(CA1區(qū))陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)
5、結(jié)果:PTZ+GS組、PTZ+LOF組點(diǎn)燃后大鼠海馬Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯高于NS+GS組、NS+LOF組、Sham組(P<0.05),LOF治療后,PTZ+LOF組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較PTZ+GS組差異有顯著性(P<0.05),以10d較著。
3、PTZ+GS組和PTZ+LOF組點(diǎn)燃后海馬組織Glu的含量較NS+GS組、NS+LOF組和Sham組有顯著增高(P<0.05),PTZ+LOF組各時(shí)間點(diǎn)Glu含量較PTZ+GS組下降(P
6、<0.05),以3 d下降趨勢(shì)明顯,從132.88下降到122.52μmol/g。GABA含量在PTZ+GS組和PTZ+LOF組各時(shí)間點(diǎn)濃度也大于NS+GS組、NS+LOF組和Sham組(P<0.05),點(diǎn)燃大鼠經(jīng)LOF治療后海馬中GABA含量較PTZ+GS組明顯升高,其中在7 d、10 d、14 d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)上較PTZ+GS組差異有顯著性(P<0.05)。
結(jié)論:LOF可以改善發(fā)育期點(diǎn)燃癲癇大鼠的認(rèn)知功能及驚厥發(fā)作頻率,其機(jī)
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