首烏僵芪湯對胰島素抵抗的PCOS臨床觀察及大鼠IRS-1、PI-3KP85α亞基表達的影響.pdf

1、目的：本研究采用臨床方首烏僵芪湯治療腎虛痰瘀型多囊卵巢綜合征(polycystic ovarysyndrome，PCOS)伴胰島素抵抗(insulin resistance，IR)患者，客觀評價患者治療前后的臨床癥狀、生殖激素水平、糖代謝指標的變化，并用實驗的方法觀察首烏僵芪湯對PCOS-IR大鼠肝臟、卵巢組織中胰島素受體底物-1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）、磷脂酰肌醇-3激酶(phospho

2、inositide3-kinase，PI-3K) p85α亞基的mRNA及蛋白表達的影響，以及對胰島素受體底物-1絲氨酸307（insulin receptor substrate-1 Ser307，IRS-1 Ser307）磷酸化蛋白表達的影響。探討首烏僵芪湯對腎虛痰瘀型PCOS-IR患者的療效和機制，為首烏僵芪湯治療PCOS-IR提供實驗依據(jù)。
　　方法：1.臨床部分收集符合本研究所制定標準病例99例，按隨機的原則分為對照組（

3、西藥組）及觀察組（對照組的基礎(chǔ)上，加用首烏僵芪湯治療），其中對照52例，觀察組47例。測量患者的身高、體重、血清FSH、LH、T、FBG、FINS、HOMA指數(shù)、TG、TC，記錄患者的月經(jīng)情況、多毛及痤瘡等臨床癥狀，以及治療后3個月內(nèi)上述癥狀的改善情況，不孕患者同時觀察受孕情況。
　　2.實驗部分使用硫酸普拉睪酮鈉及HCG并聯(lián)合高脂飲食，建立PCOS-IR模型大鼠。將成模大鼠隨機分為模型組及治療組，另設(shè)空白對照組。治療組大鼠以首烏

4、僵芪湯（高劑量組、中劑量組、低劑量組）及二甲雙胍進行干預，正常對照組灌服等容量雙蒸水，治療組和模型組在治療期間繼續(xù)給造模藥刺激并喂以高脂飼料，正常對照組喂以普通飼料，連續(xù)21天。干預第18天尾靜脈采血行IGTT，血糖儀測空腹血糖。IGTT結(jié)束后3天將所有大鼠稱重、采血，行放射免疫法檢測血清FSH、LH、T，ELISA法測空腹胰島素。后將大鼠處死、剖腹，取肝臟、雙測卵巢及其周圍脂肪組織，觀察卵巢大體解剖情況，稱取雙側(cè)卵巢及其周圍脂肪濕重，

5、光鏡下觀察卵巢組織形態(tài)。采用實時熒光定量PCR(Real-timePCR)法檢測各組大鼠肝臟、卵巢組織中IRS-1/PI3Kp85α亞基mRNA的表達，蛋白免疫印跡(Western blotting)法檢測各組大鼠肝臟、卵巢組織中IRS-1/IRS-1 Ser307/PI3Kp85α亞基蛋白的表達。
　　結(jié)果：1.在改善中醫(yī)癥候方面，治療組在改善患者月經(jīng)不調(diào)、腰膝酸軟、頭暈耳鳴、神疲乏力、胸腹痞滿、口膩痰多、小腹脹痛等癥狀療效明顯

6、優(yōu)于對照組(P＜0.05);在改善體征方面，治療組及對照組在降低BMI及治療多毛方面療效相當(P＞0.05);在治療痤瘡方面，治療組優(yōu)于對照組(P＜0.01);在不孕癥患者妊娠率方面，治療組療效優(yōu)于對照組(P＜0.05);治療組臨床總有效率明顯優(yōu)于對照組(P＜0.05);治療組在降低血清LH值、LH/FSH比值、T值、FINS、HOMA指數(shù)方面，療效均優(yōu)于對照組(P＜0.05);兩組在降低空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇方面療效相當(P＞0

7、.05)。
　　2.卵巢大體解剖觀察結(jié)果:正常對照組大鼠卵巢色澤較紅，模型對照組卵巢表面較蒼白，體積增大。模型對照組卵巢重量與正常對照組比較顯著增加(P＜0.05)。
　　3.卵巢光鏡觀察結(jié)果:正常對照組大鼠卵巢組織可見不同發(fā)育階段的卵泡及多個黃體形成，成熟卵泡內(nèi)顆粒細胞層排列整齊;模型對照組卵巢表面可見多個囊狀擴張的卵泡，卵泡內(nèi)卵母細胞或放射冠消失，顆粒細胞層數(shù)減少，較少有黃體形成。用藥后大鼠卵巢組織囊性擴張卵泡減少，顆粒

8、細胞層增厚，黃體增多，其中首烏僵芪湯高劑量組及二甲雙胍組尤為明顯。
　　4.首烏僵芪湯高劑量組明顯降低PCOS-IR大鼠血清T、FBG、FINS及HOMA指數(shù)(P＜0.01)。
　　5.模型組IRS-1、PI-3Kp85α亞基在肝臟、卵巢組織中mRNA及蛋白表達明顯低于正常組（均P＜0.01），治療組中首烏僵芪湯高劑量組及二甲雙胍組均顯著高于模型組(P＜0.01)。
　　6.模型組IRS-1 Ser307蛋白在肝臟、卵

9、巢組織中的表達均明顯高于正常組，治療組中首烏僵芪湯高劑量組及二甲雙胍組均顯著低于模型組(P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.首烏僵芪湯在臨床上能明顯改善多囊卵巢綜合征胰島素抵抗的癥狀，改善生殖激素和糖代謝水平，并提高妊娠率。
　　2.本研究成功建立了硫酸普拉睪酮鈉及HCG聯(lián)合高脂飲食誘導的PCOS-IR大鼠病理模型，并從卵巢形態(tài)學、內(nèi)分泌學等方面對該模型進行了研究。研究結(jié)果表明其病理形態(tài)和生殖激素、糖代謝指標等均與人