補腎解毒通絡(luò)方預(yù)防性治療實驗性自身免疫性腦脊髓炎大鼠的實驗研究.pdf

1、　　目的： 觀察補腎解毒通絡(luò)方對 Wistar 大鼠 EAE 的臨床表現(xiàn)、CNS病理學(xué)改變及發(fā)病過程白介素( IL)-1β和白介素( IL)-17 的影響，探討其對 MS 的防治作用和作用機制，為探索多發(fā)性硬化癥新的治療途徑提供有意義的基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　方法：
　　( 1)EAE 模型建立：采用豚鼠脊髓勻漿法制作抗原，免疫誘導(dǎo) Wistar大鼠建立急性 EAE 模型，觀察大鼠臨床體征，記錄每日體重和神經(jīng)功能評分。

2、
　　( 2)實驗動物分組及給藥：設(shè)立補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組預(yù)防性給藥，同時設(shè)置激素組、空白組、EAE 組及中藥空白組。
　　( 3)樣本采集：采用眼眶后靜脈叢采血法于免疫后第15天(發(fā)病高峰期)和21天(恢復(fù)期)采取靜脈血，分離出血清備測；心臟灌流后取腦、脊髓置于4%多聚甲醛中固定，石蠟包埋、切片。
　　( 4)蘇木素-伊紅( HE)法染色觀察腦、脊髓病理改變；ELISA 法測定血清內(nèi)白介素-1β、

3、白介素-17 含量。
　　結(jié)果：( 1)補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠的發(fā)病率與 EAE 組相比明顯減低(P<0.01) ，高劑量組與激素組發(fā)病率無明顯差異；補腎解毒通絡(luò)方高、低組大鼠的平均潛伏期較 EAE 組明顯延長(P<0.01) ，與激素組無顯著差異(P>0.05)；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠發(fā)病高峰期、發(fā)病緩解期的神經(jīng)功能評分明顯低于 EAE 組，兩組與激素組相比無顯著差異；補腎解毒通絡(luò)方高劑、中劑量組大鼠發(fā)病高峰

4、期、發(fā)病緩解期的體重明顯高于 EAE 組、中藥低劑量組，兩組與激素相比無顯著差異(P<0.05)。
　　( 2)發(fā)病高峰期補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組大鼠 CNS 中炎性病灶數(shù)與 EAE 組相比顯著減少(P<0.01) ，高劑量組與激素組相比無顯著差異(P>0.05)，中、低劑量組顯著多于激素組(P<0.01)；發(fā)病緩解期補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠 CNS 中炎性病灶數(shù)與 EAE 組相比顯著減少(P<0.01) ，高、中

5、劑量組與激素組相比無顯著差異(P>0.05)，低劑量組顯著多于激素組(P<0.01)。
　　( 3)補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組發(fā)病高峰期血清 IL-1β含量較 EAE 組顯著降低(P<0.01)，與激素組相比中、低劑量組顯著升高(P<0.01)，高劑量組與激素組無顯著差異(P>0.05)，中藥高劑量顯著低于中、低劑量組(P<0.05)，中、低劑量組之間無顯著差異(P>0.05)；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組發(fā)病緩解期血清 I

6、L-1β含量較 EAE 組顯著降低(P<0.01)，與激素組相比中、低劑量組顯著升高(P<0.01)，高劑量組與激素組無顯著差異(P>0.05) ，低劑量組顯著高于高劑量組(P<0.01) ，中、高劑量組之間無顯著差異(P>0.05)。
　　補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組發(fā)病高峰期血清 IL-17 含量較 EAE組顯著降低(P<0.01)，與激素組相比高、中、低劑量組顯著升高(P<0.01)，中、低劑量組顯著高于高劑量組(P<

7、0.05)；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組發(fā)病緩解期血清 IL-17 含量較 EAE 組顯著降低(P<0.01)，與激素組相比高、中、低劑量組顯著升高(P<0.01)，低劑量組顯著高于高劑量組(P<0.05) ，高、中劑量組無顯著差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：( 1)預(yù)防性給予補腎解毒通絡(luò)方可以明顯降低急性 EAE 大鼠的發(fā)病率、緩解臨床癥狀、縮短病程。
　　( 2)補腎解毒通絡(luò)方預(yù)防性治療能減輕 EAE 大鼠中樞神