桑椹多糖主要藥理活性及品質(zhì)相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過桑椹的免疫作用的研究，初步確定其具有免疫作用的主要部位為桑椹多糖;通過對桑椹多糖的免疫、抗氧化作用的研究及其不同產(chǎn)地、成熟度等組別的含量測定對比，為今后桑椹資源和產(chǎn)品開發(fā)，提供一定理論基礎(chǔ)。
　　研究方法：
　　1.用MTT法檢測桑椹水提物與醇提物對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影響，檢測桑椹多糖對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞增殖活性的影響；
　　2.考察紫外分光光度法測定桑椹多糖含量的最佳條件；
　　3.

2、用中性紅法檢測桑椹多糖對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響；
　　4.用水楊酸捕捉法測定桑椹多糖對·OH的清除能力；
　　5.測定不同產(chǎn)地、成熟度、來源的桑椹中桑椹多糖的含量。
　　結(jié)果：
　　1.桑椹水提物及醇提物對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞的影響
　　水提物的濃度為1g(生藥)/ml與0.5g(生藥)/ml時(shí)，對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞有明顯增殖作用(P＜0.05),并依劑量呈一定線性關(guān)系。醇提物對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞無明

3、顯增殖作用。結(jié)果表明桑椹中具有免疫作用的有效部位存在于桑椹水提物中。
　　2.桑椹多糖最佳提取方法
　　取過24目篩的桑椹藥材粉末0.2g，精密稱定，加80％乙醇溶液25ml，超聲提取至無色。小心棄去醇液，將濾渣臵于水浴鍋上揮干至無醇味。殘?jiān)芗尤胝麴s水25ml，稱重，超聲提取30min，放冷補(bǔ)重，過濾，取續(xù)濾液取續(xù)濾液稀釋到合適的倍數(shù)，制備成供試品溶液。
　　3.桑椹多糖的免疫作用
　　多糖的濃度為1g(生藥

4、)/ml，對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞有明顯增殖作用(P＜0.05),多糖濃度為0.5g(生藥)/ml時(shí)，對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞有非常顯著性差異(P＜0.01)。多糖濃度為1g(生藥)/ml，0.5g(生藥)/ml，0.25g(生藥)/ml時(shí)，對正常小鼠巨噬細(xì)胞有非常顯著性差異(P＜0.01)。不同濃度的桑椹多糖處理小鼠巨噬細(xì)胞后，其吞噬中性紅的活性與陰性組有差異。其中，多糖濃度為1g(生藥)/ml，0.5g(生藥)/ml時(shí)，能顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的

5、吞噬功能(P＜0.01)。
　　4.桑椹多糖的抗氧化作用
　　多糖不同濃度對羥自由基的清除作用都隨著濃度的增加而增大，對·OH的清除能力與其濃度具有一定的量效關(guān)系;其中多糖濃度2g/L與4g/L對羥自由基的清除作用最明顯。
　　5.不同組分桑椹的多糖含量比較
　　桑椹在未成熟前多糖含量較低，成熟后各階段多糖的含量相對穩(wěn)定，趨于穩(wěn)定;廣西區(qū)內(nèi)不同產(chǎn)地桑椹多糖含量以武鳴區(qū)的最高，欽州市的最低。藥店所售桑椹藥材多糖的含