自發(fā)性高血壓大鼠心肌重構(gòu)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的變化及多肽藥物匯利心康的調(diào)控作用.pdf

1、心肌重構(gòu)是一種引起多種心血管疾病發(fā)病率和死亡率顯著升高的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可引起心力衰竭和惡性心律失常，最終導(dǎo)致死亡。逆轉(zhuǎn)左心室肥大和重構(gòu)已成為當(dāng)前抗高血壓和治療慢性心力衰竭的重要目標(biāo)之一。匯利心康(HLXK)是本實(shí)驗(yàn)室針對(duì)在心肌重構(gòu)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的Gq蛋白α亞單位羧基末端，設(shè)計(jì)制備的一種多肽藥物，能通過抑制Gq蛋白信號(hào)傳導(dǎo)，有效抑制血管緊張素Ⅱ和去甲腎上腺素誘導(dǎo)的離體心肌細(xì)胞肥大反應(yīng)，以及多種不同動(dòng)物模型的心肌重構(gòu)。
　　 然

2、而，心肌細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)是一個(gè)十分復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，由眾多的神經(jīng)體液分子、受體、G蛋白、效應(yīng)器、第二信使、轉(zhuǎn)錄因子等共同組成。其中多個(gè)信號(hào)分子之間都存在著反饋調(diào)節(jié)和交互作用，任何一個(gè)節(jié)點(diǎn)的變化都可能對(duì)整個(gè)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而精細(xì)調(diào)控整個(gè)細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)乃至組織器官功能。HLXK拮抗Gq功能后，不僅會(huì)影響Gq蛋白下游信號(hào)分子的表達(dá)和功能，而且可能對(duì)其他通路的信號(hào)分子產(chǎn)生影響。因此，研究HLXK對(duì)心肌細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的影響不僅有助于進(jìn)一步深入理

3、解其抗心肌重構(gòu)作用機(jī)制，而且有助于了解其對(duì)心肌功能的整體影響。
　　 方法：
　　 1.動(dòng)物分組：SHR雄性大鼠18只，隨機(jī)分為模型組、氯沙坦組和HLXK組(n=6)，分別給予生理鹽水(normal saline，NS)2ml/kg(ip，bid)、氯沙坦6mg/kg(ig，qd)和HLXK90μg/kg(ip，bid)，連續(xù)8W；并設(shè)立WKY大鼠正常對(duì)照，給予NS(2ml/kg，ip，bid)，連續(xù)8W。
　　

4、 2.實(shí)驗(yàn)過程中，密切觀察大鼠的一般情況及其死亡情況。末次給藥后，稱量體重，頸椎脫臼處死，稱重法測定大鼠的心臟指數(shù)和左心室指數(shù)。
　　 3.采用定量PCR芯片技術(shù)檢測大鼠心肌組織中心肌重構(gòu)相關(guān)通路的信號(hào)分子表達(dá)情況。
　　 4.結(jié)合PCR芯片篩選結(jié)果，采用Real-time PCR和Western blot進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：
　　 1.與WKY大鼠相比，SHR出現(xiàn)明顯心肌重構(gòu)；HLXK能明顯降低SH

5、R大鼠的心臟指數(shù)和左心室指數(shù)，改善左心室重構(gòu)；
　　 2.在SHR心肌重構(gòu)信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子表達(dá)明顯上調(diào)的有Serpine1、Jun、Slpr3、Max、Grm1、Illr1、Cdkn1a、Crhr1、Chhr2、Ctgf、Edn1、Fgf2、Bcl211、AC5和Akt1；表達(dá)明顯下調(diào)的有Bai1、Ccnd1、Gcgr、Nos2(iNOS)、Pik3cg、Ptgdr、Sctr、Tnf和Vcam1。
　　 3.

6、RT-PCR芯片結(jié)果顯示HLXK能有效抑制Cdkn1a、Ctgf和Edn1基因表達(dá)，上調(diào)Grm4、Nos2和Tshr基因的表達(dá)。
　　 4.HKXK能明顯增加SHRα-MHC mRNA的表達(dá)，降低CaN mRNA、CDKN1AmRNA和β-MHC mRNA的表達(dá)；
　　 5.HKXK能明顯增加SHRα-MHC蛋白表達(dá)，降低CaN、CDKN1A和β-MHC蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　　 1.自發(fā)性高血壓大鼠