GLUT4和UCP2在非酒精性脂肪性肝病中的作用以及小檗堿對(duì)GLUT4和UCP2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展給人們的飲食及生活習(xí)慣帶來了巨大轉(zhuǎn)變，非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者隨之增加。研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗、代謝綜合征、氧化應(yīng)激、凋亡易感性增加、脂質(zhì)代謝異常等參與了NAFLD的發(fā)病，但仍不能完全解釋其發(fā)病機(jī)制。解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)與糖類和脂質(zhì)代謝、氧化應(yīng)激、胰島素抵抗及能量代謝密切相關(guān)，但在NAFLD發(fā)病中的作用尚缺乏進(jìn)一步研究。NAFLD的治療目前尚無特效藥物，大部分臨床藥物在治療

2、同時(shí)存在一定副作用，療效也無法肯定。小檗堿(BBR)是一種低毒副作用、物美價(jià)廉的藥物，能夠降糖調(diào)脂、改善胰島素抵抗，因此是否可以用于NAFLD的治療？本研究旨在探討UCP2、GLUT4在NAFLD發(fā)病中作用，以及小檗堿對(duì)NAFLD的療效和作用機(jī)制，從而為NAFLD發(fā)病機(jī)制提供新的理論依據(jù)，為NAFLD臨床治療提供新方法。
　　方法:雄性SD大鼠56只，常規(guī)飼養(yǎng)1周，隨機(jī)分為正常組(24只，基礎(chǔ)喂養(yǎng))和模型組(32只，高脂喂養(yǎng))。第

3、5、9周末分別隨機(jī)處死兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各8只，并將剩余模型組隨機(jī)分為兩組（模型組8只，干預(yù)組8只），干預(yù)組予以鹽酸小檗堿灌胃，模型組及剩余正常組用等量的蒸餾水灌胃，干預(yù)4周后處死全部大鼠。各階段各組處死大鼠均經(jīng)下腔靜脈采血，測定肝功(AST、ALT)、血脂(TC、TG)、血糖代謝指標(biāo)(FBG、FINS)，并計(jì)算HOMA-IR。此外，采集部分肝組織制成石蠟切片后行HE染色，光鏡下觀察病理學(xué)改變，并經(jīng)免疫組化法觀察UCP2、GLUT4蛋白表達(dá)情

4、況;部分肝組織經(jīng)液氮凍存后于-70℃下保存，用于RT-PCR檢測GLUT4mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:1.模型組血AST、ALT、TC、TG、FBG、FINS、HOMA-IR較正常組升高，除第5周兩組間AST、ALT無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性(P＞0.05)，其余各階段兩組間的差異性均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。2.隨高脂飲食時(shí)間的延長，模型組血AST、ALT、TC、TG、FBG、FINS、HOMA-IR呈升高趨勢(P＜0.05)。3.干預(yù)組

5、較同期模型組血AST、ALT、TC、TG、FBG、FINS、HOMA-IR降低(P＜0.01)，但高于正常組(P＜0.01)。4.模型組較正常組肝組織GLUT4表達(dá)降低(P＜0.01)，UCP2表達(dá)增加(P＜0.01)。5.隨高脂飲食時(shí)間的延長，模型組肝組織GLUT4表達(dá)逐步下調(diào)(P＜0.01)，UCP2表達(dá)逐步上調(diào)(P＜0.01)。6.干預(yù)組較同期模型組肝組織GLUT4表達(dá)增加(P＜0.01)，UCP2表達(dá)下降(P＜0.01)，但沒有

6、恢復(fù)正常(P＜0.01)。
　　結(jié)論:1.高脂飲食喂養(yǎng)一定時(shí)間后可以成功建立大鼠NAFLD模型，模型大鼠可見到明顯肝細(xì)胞脂肪變、脂肪性肝炎、胰島素抵抗、高胰島素血癥等特征;2.隨造模周期的延長，GLUT4mRNA及蛋白表達(dá)明顯降低，UCP2蛋白表達(dá)則明顯升高，大鼠表現(xiàn)出明顯的脂質(zhì)代謝紊亂、胰島素抵抗，肝組織可見明顯脂肪變、炎變、壞死。因此，GLUT4和UCP2可能通過參與胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝、氧化應(yīng)激、能量代謝等在NAFLD的發(fā)生