藍莓對非酒精性脂肪性肝病大鼠Nqo1、GCLC、UCP2表達的影響.pdf

1、目的：
　　通過探究藍莓對非酒精性脂肪性肝?。╪onalcoholic fatty liver disease，NAFLD）大鼠NADPH醌氧化還原酶（NAD(P)H:quinine oxidoreductase1，Nqo1）、γ-谷氨酸半胱氨酸轉(zhuǎn)移酶催化亞基（Gamma glutamylcysteine synthetase catalytic subunit，GCLC）及解偶聯(lián)蛋白2（Uncoupling Protein2，U

2、CP2）表達的影響，進而探討藍莓對NAFLD氧化應(yīng)激損傷和能量合成的作用，并研究其可能的作用機制。
　　方法：
　　以SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病模型，50只大鼠隨機分配為①正常組（A組，10只）作為對照；②藍莓組（B組，10只），以藍莓原漿（15ml/kg）干預(yù)；③異甘草酸鎂組（C組，10只），以異甘草酸鎂溶液（15mg/kg）干預(yù)；④模型組（D組，10只），按造模方案喂飼；⑤京尼平苷組（E組，10只），以京尼平苷溶液（

3、100mg/kg）干預(yù)。病理學(xué)方法明確造模情況及各干預(yù)組肝臟病理學(xué)改變，血生化方法檢測肝功能丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ Alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（Aspartate aminotransferse，AST）及脂代謝指標(biāo)甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）；ELISA法檢測肝組織丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、還原

4、型谷胱甘肽（Glutathione Tablets，GSH）含量及超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活性。采用Western Blot技術(shù)檢測Nqo1、GCLC蛋白表達情況；采用熒光素酶發(fā)光法檢測肝細胞內(nèi)ATP的含量，實時熒光定量PCR技術(shù)、Western-blot技術(shù)檢測UCP2的表達。
　　結(jié)果：
　?、俨±頇z測結(jié)果：正常組HE染色肝小葉結(jié)構(gòu)完整，條索清晰，油紅O染色未見紅色脂質(zhì)沉積；模型

5、組HE染色切片可見肝細胞彌漫性空泡變性及肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，部分區(qū)域出現(xiàn)炎癥細胞浸潤，油紅O染色見明顯脂質(zhì)沉積；藍莓組與異甘草酸鎂組HE染色肝細胞空泡變性及炎性細胞浸潤明顯較少，藍莓組與京尼平苷組油紅O染色提示脂質(zhì)沉積較模型組少。
　?、谘瘷z測肝功能與脂代謝指標(biāo)：正常組ALT、AST和 TG、TC、FFA含量明顯低于模型組（P<0.05），藍莓組ALT、AST和TG、TC、FFA含量明顯低于模型組（P<0.05），但高于正常組（P

6、<0.05），異甘草酸鎂組ALT、AST和TG、TC含量低于藍莓組（P<0.05），京尼平苷組ALT、AST和TG、FFA含量與藍莓組無顯著差異。
　?、垩趸a(chǎn)物和氧化酶含量檢測：正常組與模型組相比MDA含量明顯較低（P<0.05），SOD活性和GSH含量明顯較高（P<0.05）；藍莓組和異甘草酸鎂組MDA含量明顯低于模型組（P<0.05），GSH含量、SOD活性明顯高于模型組（P<0.05）；異甘草酸鎂組各指標(biāo)與藍莓組無顯著差異

7、。
　?、躈qo1和GCLC蛋白表達：正常組Nqo1及GCLC蛋白表達低于模型組，藍莓組和異甘草酸鎂組Nqo1及GCLC蛋白表達明顯高于正常組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。
　?、軦TP含量：模型組顯著低于正常組（P<0.05），藍莓組顯著高于模型組（P<0.05），低于京尼平苷組。
　?、轚CP2 mRNA和蛋白表達：正常組表達均明顯低于模型組（P<0.05），藍莓組表達高于正常組（P<0.05），京