熱敷藥對硬皮病動物模型真皮厚度和Ⅰ型膠原影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過動物實驗觀察真皮厚度和I型膠原在“熱敷藥”作用下的變化，為“熱敷藥”治療硬皮病的抗纖維化作用提供實驗基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　 方法：采用Yamamoto硬皮病的造模方法，60只BALB/c小鼠隨機分為2組，一組空白組10只，一組模型組50只，均剃去背部中央?yún)^(qū)相同部位被毛，面積1.5×1.5cm大小。模型組以4 1/2注射針頭在小鼠背部中央被毛區(qū)皮下注射博萊霉素磷酸緩沖液，濃度200μg/ml，0.1ml/次，空白組注射磷酸緩沖

2、液0.1ml/次，1次/日。兩組均連續(xù)注射5周?！盁岱笏帯蹦M臨床用藥方法，采用以“熱敷藥”糊浸泡或涂抹硬皮病皮損的方法，“熱敷藥”粉（300g/袋）分別加開水3000、1500、750ml攪拌煮沸，制成10％、20％、40％藥糊。將模型組50只小鼠隨即分為小濃度組、中濃度組、大濃度組、模型組、對照組，每組10只，對應(yīng)的在背部皮損處外涂10％、20％、40％熱敷藥藥糊，模型組不用藥，西藥組用肝素鈉軟膏，1次/日，連續(xù)1月。以上用藥均為1

3、次/日，連續(xù)1月。用藥結(jié)束后前一天禁食，不禁水，第二天采用脊椎脫臼法處死，取背部皮膚組織經(jīng)10％福爾馬林液固定。取皮膚組織脫水，石蠟包埋，HE染色后，使用分析軟件分析小鼠真皮厚度。采用免疫組化技術(shù)檢測各組小鼠皮膚組織Ⅰ型膠原蛋白表達情況，通過相關(guān)軟件分析免疫組化指數(shù)。通過觀察熱敷藥用藥前后對硬皮病小鼠模型的皮損處一般形態(tài)學(xué)和真皮厚度的變化，及對器官纖維化的物質(zhì)胞外基質(zhì)的主要成分（Ⅰ型膠原）含量的變化，明確“熱敷藥”對硬皮病小鼠模型皮膚纖

4、維化的治療作用。
　　 結(jié)果：真皮厚度：空白組與各組之間兩兩分析，各組之間P>0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義，及真皮厚度無明顯變化。Ⅰ型膠原蛋白平均灰度值：經(jīng)各組之間兩兩分析，空白組和其余各組有差異，P＜0.05；模型組和低濃度組無差異，P＞0.05；模型組和中濃度組、高濃度組有差異，P＜0.05；中濃度組和高濃度組有差異即高濃度組治療效果優(yōu)于中濃度組，P＞0.05。
　　 結(jié)論：1．“熱敷藥”在25℃-30℃之間外用硬皮病真皮